Митохондриальный синдром у ребенка это

Содержание:

Митохондриальный синдром у ребенка

Митохондриальные болезни, и в частности митохондриальный синдром, который может проявляться поражениями ЦНС, сердца и патологиями скелетной мускулатуры, сегодня являются одним из важнейших разделов нейропедиатрии.

Митохондрия – что это?

Как многие помнят из школьного курса биологии, митохондрия представляет собой одну из клеточных органелл, чьей основной функцией является образование в процессе клеточного дыхания молекулы АТФ. Кроме того, в ней происходит окисление жирных кислот, проходит цикл трикарбоновых кислот и множество других процессов. Исследования, проведенные в конце XX века, позволили выявить ключевое значение митохондрий еще и в таких процессах, как чувствительность к лекарствам, старение клеток, апоптоз (запрограммированная гибель клеток). Соответственно, нарушение их функций приводит к недостаточности энергообмена, и как следствие, повреждению и гибели клетки. Особенно ярко эти нарушения проявляются в клетках нервной системы и скелетной мускулатуры.

Митохондриология

Генетические исследования позволили определить, что митохондрии обладают собственным геномом, отличным от генома ядра клетки, и нарушения в ее функционировании чаще всего связаны с происходящими там мутациями. Все это позволило выделить научное направление, изучающее заболевания, связанные с нарушениями функций митохондрий, – митохондриальные цитопатии. Они могут быть как спорадическими, так и врожденными, наследующимися по линии матери.

Симптоматика

Митохондриальный синдром может проявиться в различных системах человека, но наиболее выраженные проявления получают неврологические симптомы. Это связано с тем, что нервная ткань наиболее сильно подвержена влиянию гипоксии. Характерными признаками, позволяющими подозревать митохондриальный синдром при поражении скелетной мускулатуры, являются гипотония, неспособность адекватно переносить физические нагрузки, различные миопатии, офтальмопарез (паралич глазодвигательных мышц), птоз. Со стороны нервной системы могут быть инсультоподобные проявления, судороги, пирамидные расстройства, расстройства психики. Как правило, митохондриальный синдром у ребенка всегда проявляется задержкой развития или утратой уже полученных навыков, нарушениями психомоторики. Со стороны эндокринной системы не исключено развитие диабета, нарушений функций щитовидной и поджелудочной желез, задержка роста, полового созревания. Поражения сердца могут развиваться как на фоне патологий других органов, так и изолированно. Митохондриальный синдром в этом случае представлен кардиомиопатией.

Диагностика

Митохондриальные болезни чаще всего обнаруживаются в период новорожденности или на первых годах жизни ребенка. По данным зарубежных исследований, эта патология диагностируется у одного новорожденного из 5 тысяч. Для диагностики проводят комплексное клиническое, генетическое, инструментальное, биохимическое и молекулярное обследование. На сегодняшний день существует целый ряд методов, позволяющих определить эту патологию.

  1. Электромиография – при нормальных результатах на фоне резко выраженной мышечной слабости у пациента позволяет подозревать митохондриальные патологии.
  2. Лактоацидоз очень часто сопровождает митохондриальные болезни. Конечно, только его присутствия недостаточно для постановки диагноза, но измерение уровня молочной кислоты в крови после физической нагрузки может быть очень информативным.
  3. Биопсия скелетных мышц и гистохимическое исследование полученного биоптата является наиболее информативным.
  4. Хорошие результаты показывают одновременное применение световой и электронной микроскопии скелетных мышц.

Митохондриальная энцефалопатия (синдром Лея)

Одним из самых частых заболеваний детского возраста, связанных с генетическими изменениями митохондрий, является синдром Лея, впервые описанный в 1951 году. Первые признаки появляются в возрасте от одного до трех лет, но возможны и более ранние манифестации — на первом месяце жизни или, напротив, после семи лет. Первые проявления заключаются в задержке развития, снижении массы тела, потере аппетита, повторной рвоте. Со временем присоединяется неврологическая симптоматика – нарушение тонуса мышц (гипотония, дистония, гипертонус), судороги, нарушение координации.

Болезнь затрагивает органы зрения: развивается атрофия зрительных нервов, дегенерация сетчатки, глазодвигательные нарушения. У большинства детей заболевание постепенно прогрессирует, нарастают признаки пирамидальных расстройств, появляются расстройства глотания, дыхательной функции.

Одним из детей, страдающих такой патологией, стал Пугачев Ефим, митохондриальный синдром которому был диагностирован в 2014 году. Его мама, Елена, просит помощи у всех неравнодушных людей.

Митохондриальный синдром у ребенка

Прогноз, к сожалению, на сегодняшний день чаще всего бывает неутешительным. Это связано как с поздней диагностикой болезни, отсутствием детальной информации о патогенезе, тяжелым состоянием пациентов, связанным с мультисистемностью поражений, так и с отсутствием единого критерия оценки эффективности терапии.

Таким образом, лечение подобных заболеваний находится еще в стадии разработки. Как правило, оно сводится к симптоматической и поддерживающей терапии.

Митохондриальные нарушения (пожалуйста, отзовитесь кто-нибудь)

Да, у нас был синдром Отахара. Потом он трансформировался в с-м Веста. Добились ремиссии на Талдомской (МНИИ педиатрии). Там также очень хорошее генетическое отделение. Когда мы лежали та Талдомской, про митохондриальные нарушения я не слышала — давно это было:) Но карнитин тоже долго пили.

Насчет детей — Катя у меня четвертый ребенок. Первые три абсолютно здоровы. 10.01.2011 21:37:56, Cheroka

У моего сына тригидроксиизомасляная ацидурия, тоже относится к митохондриальной недостаточности. У нас вероятность повторения 25%. Есть второй ребенок, без этой патологии.

Наверняка вам никто не скажет, что вас ждет. Обязательно консультируйтесь со специалистами и дальше — решать вам. Удачи! 06.01.2011 00:17:02, мама Антона

Автореферат и диссертация по медицине (14.00.09) на тему: Клиническое значение митохондриальных нарушений у детей с недифференцированными формами задержки нервно-психического развития

Оглавление диссертации Тозлиян, Елена Васильевна :: 2003 :: Москва

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Роль наследственных факторов в основе задержки нервно-психического развития у детей.

1.2. Митохондриальные дисфункции как причина многообразных нарушений нервно-психического и физического развития у детей.

1.2.1. Основные патогенетические звенья нарушений клеточного энергообмена.

1.2.2. Физиологическая роль окислительно-восстановительных ферментов в энергообеспечении клеток.

1.2.3. Современное представление о «первичности» и «вторичности» митохондриальных нарушений.

1.3. Методы диагностики митохондриальной патологии у детей.

1.4. Программы выявления наследственных нарушений обмена (всгеептд-программы).

1.5. Перспективы ранней диагностики митохондриальных нарушений у детей.

ГЛАВА 2. ХАРАКТЕРИСТИКА ОБСЛЕДОВАННЫХ ДЕТЕЙ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Группы обследованных

2.2. Методы исследования.

2.2.3.Методы функциональной диагностики.

2.2.4.Биохимические методы исследования.

2.2.6.Морфологические методы исследования.

ГЛАВА 3. ОЦЕНКА КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ХАРАКТЕРИСТИК ЦИТОХИМИЧЕСКОГО МОРФОМЕТРИЧЕСКОГО АНАЛИЗА АКТИВНОСТИ ФЕРМЕНТОВ ЭНЕРГЕТИЧЕСКОГО ОБМЕНА.

3.1. Нарушения энергетического обмена у детей с недифференцированными формами задержки нервно-психического развития.

3.2. Оценка диагностической ценности визуального и компьютерного анализа цитохимических параметров активности митохондриальных ферментов.

3.3. Сравнительная характеристика различных методов выявления нарушений клеточной биоэнергетики.

ГЛАВА 4. КОМПЛЕКСНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА КЛИНИЧЕСКИХ, БИОХИМИЧЕСКИХ, ЦИТОХИМИЧЕСКИХ И МОРФОЛОГИЧЕСКИХ ПАРАМЕТРОВ ОБСЛЕДОВАННЫХ ДЕТЕЙ.

4.1. Клиническая характеристика обследованных детей.

4.2. Характеристика содержания молочной и пировиноградной кислот в сыворотке крови.

4.3. Характеристика содержания продуктов перекисного окисления липидов (малонового диапьдегида и гидроперекисей) и уровня антиокислительной активности плазмы крови у обследованных детей.

4.4. Характеристика морфометрических параметров цитохимического анализа активности ферментов энергетического обмена в разных группах обследованных детей.

4.5. Данные морфологических методов исследования.

4.6. Оценка информативности цитохимического метода при анализе эффективности применяемой терапии.

Введение диссертации по теме «Педиатрия», Тозлиян, Елена Васильевна, автореферат

Актуальность проблемы. Нарушения нервно-психического развития, в значительной степени обусловливая инвалидизацию детей, представляют актуальную проблему для педиатрии, имеющую не только медицинское, но и огромное медико-социальное значение [9,10,17].

Благодаря успехам совместных исследований клиницистов, биохимиков, генетиков, морфологов начался этап активного изучения митохондриальных болезней, обусловленных дефектами структуры и функции митохондрий и, как следствие, недостаточностью энергетической продукции клеток, что может явиться причиной тяжелых расстройств центральной нервной, нервно-мышечной систем и других органов [961.

К первичным митохондриальным болезням, детерминируемым дефектами ядерной и митохондриальной ДНК, относят заболевания, обусловленные нарушениями внутримитохондриальных процессов: синдромы MELAS — mitochondrial ‘ encephalomyopathy, lactic acidosis, stroke-like episodes (митохондриальная энцефаломиопатия, лактат-ацидоз, инсультоподобные эпизоды), MERRF — myoclonus epilepsy and ragged-red fibres (миоклонус-эпилепсия, «рваные красные волокна»), Кернса-Сейра (наружная офтальмоплегия, пигментный ретинит, атриовентрикулярная блокада сердца), фумаровая ацидемия, нарушения ß-окисления жирных кислот, подострая некротизирующая энцефаломиопатия Лея и др.

Однако, полиморфизм заболеваний, при которых имеется митохондриальная дисфункция, определяется в первую очередь тем, что наряду с первичными митохондриапьными болезнями существует обширный класс состояний, характеризующийся вторичной митохондриальной недостаточностью (моногенные болезни соединительной ткани, туберозный склероз, некоторые формы прогрессирующих мышечных дистрофий и др.) [18,34,59]. Причинами вторичного угнетения митохондриальной активности могут быть токсические агенты (продукты перекисного окисления липидов), лекарственные препараты (вальпроевая кислота, левомицетин и др.), экопатогены (соли тяжелых металлов и др.), гипотиреоз, дефицит карнитина [96,116]. Митохондрии являются полифункциональным и обязательным звеном клеточного гомеостаза. Поэтому многочисленные нарушения различных тканевых и органных систем приводят к сопутствующим митохондриальным изменениям.

Отсутствие адекватных, относительно простых и малотравматичных методов исследования до настоящего времени тормозило создание диагностических программ, направленных на раннее выявление наследственных нарушений биоэнергетического обмена у детей.

Техническая сложность, высокая стоимость и инвазивность некоторых диагностических методов, принятых в мировой практике в качестве стандартных способов диагностики нарушений клеточной энергетики (в частности, биопсии скелетной мышцы и молекулярно-генетического анализа), затрудняет их использование для ранней диагностики митохондриальной патологии, лабораторного контроля над динамикой состояния больных, определения ожидаемого клинического эффекта терапии митохондриальных нарушений у детей.

Более предпочтительным в таком случае может быть цитохимический анализ ферментного статуса лимфоцитов периферической крови, достоверно отражающий энергетический обмен клеток и тканей [35,126]. Доказательством адекватности применения цитохимического анализа лимфоцитов при митохондриальных болезнях является установленная корреляция функциональной активности митохондрий лимфоцитов с тестом RRF — ragged-red fibres («рваные красные волокна») в биоптатах мышц. Морфометрическими методами удалось показать, что функциональная активность митохондрий лимфоцитов у детей с митохондриальными болезнями достоверно снижена по сравнению с здоровыми.

Таким образом, лабораторная характеристика статуса митохондриальных ферментов лимфоцитов периферической крови может служить для анализа полисистемной митохондриальной недостаточности у детей [20,126].

Для диагностики митохондриальной недостаточности целесообразно определение активности дегидрогеназ лимфоцитов: сукцинатдегидрогеназы, апьфа-глицерофосфатдегидрогеназы, глутаматдегидрогеназы, лактатдегидрогеназы и малатдегидрогеназы, так как эти энзимы занимают ключевые позиции в аэробном и анаэробном энергообеспечении клетки и снижение их активности является маркером митохондриальной дисфункции [126].

Исходя из вышеизложенного, была обоснована цель исследования:

Определить роль нарушений клеточного энергообмена у детей с недифференцированными расстройствами нервно-психического развития путем применения диагностического комплекса с использованием цитохимического анализа активности ферментов энергетического обмена и разработать схему ранней диагностики этих нарушений.

Для достижения поставленной цели в работе решались следующие задачи:

1. На основе клинико-биохимических критериев среди детей с недифференцированными нарушениями нервно-психического развития выявить фуппу больных с подозрением на заболевания клеточной биоэнергетики.

2. Установить признаки митохондриальных нарушений в исследуемой группе детей на основании изменений активности митохондриальных ферментов в лейкоцитах периферической крови методом морфометрии.

3. Идентифицировать виды митохондриальной патологии у детей с выявленными изменениями активности митохондриальных ферментов в лейкоцитах периферической крови с использованием дополнительного биохимического исследования показателей биоэнергетического обмена, морфологического анализа скелетной мышцы, хромато-масс-спектрометрии мочи, молекулярно-генетического анализа.

4. Определить специфичность и чувствительность цитологического метода ранней диагностики митохондриальных нарушений путем сопоставления с данными других методов диагностики нарушений клеточного энергообмена.

5. Оценить информативность цитохимического метода для анализа эффективности лечения детей с болезнями клеточной биоэнергетики препаратами 1-карнитина.

Научная новизна работы.

Доказана роль митохондриальных нарушений в задержке нервно-психического развития у детей.

Определены объективные клинико-лабораторные критерии, позволяющие среди детей с задержкой развития выявить заболевания митохондриального генеза.

Установлена чувствительность, специфичность и информативность цитохимического анализа активности ферментов энергетического обмена для раннего выявления болезней клеточной биоэнергетики у детей с задержкой развития.

Научно обоснована и доказана клиническая эффективность Ькарнитина при митохондриальных заболеваниях.

Обоснована целесообразность применения комплекса клинико-лаборатор чых методов, включающих цитохимический анализ ферментного статуса лимфоцитов в качестве теста ранней диагностики нарушений биоэнергетики у детей с недифференцированными нарушениями нервно-психического развития, а также для контроля эффективности применяемой энерготропной терапии.

Определены показания для углубленного обследования детей с задержкой развития с целью уточнения формы митохондриальной патологии.

Обосновано включение препаратов Ь-карнитина в комплексное лечение детей с митохондриальными нарушениями.

Решение поставленных задач осуществлялось в отделе врожденных и наследственных заболеваний у детей с нарушениями психики (руководители — [проф., д.м.н. Л.3.Казанцева], доктор медицинских наук П.В.Новиков), научно-исследовательской лаборатории общей патологии (руководитель — доктор медицинских наук В.С.Сухорукое) Московского НИИ педиатрии и детской хирургии Министерства здравоохранения Российской Федерации (директор — профессор, доктор медицинских наук АДЦарегородцев).

Внедрение в практику. Полученные результаты легли в основу пособия для врачей «Раннее выявление митохондриальной недостаточности у детей с недифференцированными формами задержки нервно-психического развития».

Новый метод ранней диагностики нарушений энергетического обмена у детей с недифференцированными формами задержки нервно-психического развития апробирован и внедрен в практическую работу Московского НИИ педиатрии и детской хирургии МЗ РФ, Федерального Центра наследственной патологии у детей, детской поликлиники N 47 Западного Административного Округа г. Москвы.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены на IX Съезде педиатров России (г. Москва, 2001), Всероссийском рабочем совещании «Митохондрии в патологии» (г. Пущино, 2001), IX Российском Национальном Конгрессе «Человек и лекарство» (г.Москва, 2002), I Всероссийском Конгрессе «Современные технологии в педиатрии и детской хирургии» (г.Москва, 2002), 2-ой Всероссийской конференции «Клинические и патогенетические проблемы нарушений клеточной энергетики (митохондриапьная патология)» (г.Москва, 2002).

По теме диссертации опубликовано 17 печатных работ, из них 2 — в зарубежной печати.

Митохондриальная миопатия

Если мало изучена, то какие могут быть претензии к их сомнениям по поводу лечения? До Антона было описано всего семь случаев его болезни. В генетике на Талдомской поставили диагноз и сказали, что ставят его всего два года.

Вдруг врачи опасаются чрезмерной стимуляции или чего-то еще? Хотят чтобы запас был? Я не в теме болезни, но повторюсь, мы там практически жили. Отпускали со словами «через пару месяцев приезжайте».

Боритесь, никто кроме вас колотиться не будет. Спрашивайте, выясняйте, не уходите пока не разберетесь, пусть прослывете надоедливой и конфликтной, но в конечном итоге все понимают, что это для ребенка делается. 28.10.2014 21:09:52, фа

Митохондриальный синдром у ребенка это

Митохондриальные нарушения — это обширная группа патологических состояний, обусловленных генетическими, структурными, биохимическими дефектами митохондрий, нарушением тканевого дыхания, снижение синтеза АТФ, и, как следствие, недостаточностью энергетического обмена и связанных с патологией митохондриального или ядерного генома. Нарушения клеточной энергетики приводят к полисистемным заболеваниям. В первую очередь страдают органы и ткани, наиболее энергозависимые — нервная система (энцефалопатии, полиневропатии), мышечная система (миопатии), сердце (кардиомиопатии), почки, печень, эндокринная система и другие. До самого недавнего времени все эти заболевания определялись под многочисленными масками других патологических форм. К настоящему времени выявлено более 200 заболеваний, причиной которых являются мутации митохондриальной ДНК. Митохондриальная генетика отличается от менделевской в трех важнейших аспектах: материнское наследование, гетероплазмия (одновременно существование в клетке нормального (дикий) и мутантного типов ДНК), митотическая сегрегация (оба типа мтДНК в процессе деления клетки могут распределяться случайным образом между дочерними клетками), что определяет выраженный фенотипический полиморфизм и мультисистемность поражения. заболевания.

Другие публикации:  Описание кур породы павловская

Мы обследовали 32 ребенка (6 мес-16лет) с подозрением на наличие митохондриальной болезни. Пациентам проводилось комплексное клиническое, биохимическое обследование, включая исследование уровня лактата крови, аммиака, карнитина; проводилось исследование — тандемная масспектрометрия, для исключения заболеваний, связанных с нарушением обмена аминокислот, органических кислот, дефекта b-окисления липидов, МРТ головного мозга, ЭЭГ, ЭКГ, УЗИ внутренних органов, сердца, SPECT. Генетическое обследование включало в себя исследование митохондриальной ДНК путем сиквенса. У 23 детей митохондриальная патология была подтверждена. У остальных результаты не получены.

Наиболее часто встречающимися общими признаками были: мышечная гипотония, гипермобильный синдром, снижение мышечной силы, снижение толерантности к физическим нагрузкам, гиперактивность. У всех были выявлены нарушения ритма сердца различной природы. Многие дети страдали мигренеподобными головными болями, периодическими рвотами, у многих выявлялась транзиторная гипогликемия, у большинства пациентов, при нормальном интеллектуальном развитии, выявлялась задержка формирования речи. У части детей выявлялась атаксия, миоклонус, летаргические проявления, птоз,нарушение зрения, интеллектуальная недостаточность.

Генетические исследования, проведенные у этих детей, выявили следующее: A3243G, A11084G-частые мутации MELAS ( MELAS — митохондриальная энцефаломитопатия, лактат-ацидоз и инсультоподобные пароксизмы), мутации в ATPsynthase 6, цитохромС оксидаза, 16S rRNA (T3197C), tRNA lysine, 2 ND A5069G/N235D, 1ND,множественные точковые мутации mtDNA. Эпилепсия была выявлена у 9 пациентов, в комбинации с дилятационной каридиомиопатией — у 2 детей. Комбинация дилятационной кардиомиопатии с развитием инсульта — у троих из 9 пациентов. У двоих детей инсульт был первым проявлением митохондриальной болезни.16SrRNA мутации представлены гипогликемией, эпилептиформными ЭЭГ-изменениями, судорогами, инсультоподобными пароксизмами. Первыми проявлениями мутации АТФ синтазы 6 была дилятационная кардиомиопатия. В дальнейшем возникали инсультоподобные пароксизмы и судороги. В нашем исследовании у троих детей, имеющих частые мутации MELAS проявлением заболевания был не инсульт, а судороги, т.е. эпилепсия. В противоположность этому, у 5 пациентов с развившимся инсультом мутации, характерные для синдрома MELAS выявлены не были. В нашей клинике всем больным проводились курсы лечения препаратами, являющимися кофакторами ферментов метаболизма митохондрий, такие как янтавит, коэнзим Q10, элькар, токоферол, витамины В1 и В2, С, что позволило в большинстве случаев уменьшить степень выраженности неврологического дефицита и стабилизировать состояние больных.

В заключении необходимо отметить, что заболевания, связанные с дисфункцией митохондрий, могут быть представлены множеством симптомов, даже при выявлении одной и той же мутации. Важность своевременной диагностики митохондриальных болезней, поиска клинических и параклинических критериев этих заболеваний на этапе предварительном, догенетическом, необходимо для подбора адекватной метаболической терапии и предотвращения ухудшения состояния или инвалидизации больных с этими редкими заболеваниями.

Митохондриальные заболевания у детей

Под митохондриальными заболеваниями подразумевают целую категорию неоднородных болезней наследственного характера. Болезни, относящиеся к рассматриваемой группе, имеют связь с дефектами структурного, генетического и биохимического характера, затрагивающими митохондрии. Патологии влекут за собой нарушение энергетического функционирования внутри клеток эукариотических микроорганизмов.

Врачи начали наблюдать за тем, как проявляются митохондриальные заболевания ещё в 20-м веке. Стремясь определить, от чего может быть любая из митохондриальных болезней, специалисты обнаружили более 50 разновидностей болезней, которые имеют связь с нарушениями, затрагивающими митохондрии.

В зависимости от причин, различают три основных подгруппы митохондриальных заболеваний, а именно:

  • Болезни, вызванные мутациями митохондриальной ДНК. Подобные дефекты имеют связь с точечной мутацией различных элементов и наследуются преимущественно от матери. Также, болезни может вызвать структурная дислокация. К этой категории болезней относятся такие наследственные синдромы Кернса-Сейра, Пирсона, Лебера и т. д.
  • Болезни, вызванные дефектами на уровне ядерной ДНК. Мутации влекут за собой нарушение функционирования митохондрий. Кроме того, они могут вызывать негативные изменения ферментов, участвующих в циклическом биохимическом процессе, в частности – обеспечении клеток в организме кислородом. Сюда можно отнести синдромы Люфта и Альперса, диабетические заболевания и т. д.
  • Болезни, вызванные дефектами на уровне ядерной ДНК и, как следствие, вызывающие вторичную деформацию ДНК митохондрий. К списку вторичных изменений относятся печеночная недостаточности и синдромы, типа того что был выявлен Де Тони-Дебре-Фанкони.

На протяжении длительного срока времени, мутации и, как следствие, митохондриальные болезни, могут не проявляться у несовершеннолетнего пациента. Однако, с течением времени, скопление нездоровых органелл увеличивается, в результате, начинаются проявления первых признаков того или иного заболевания.

Так как заболевания митхондриальной группы представляют собой целую группу патологий, то и признаки этих болезней существенно различаются в зависимости от того, какие органы и системы детского организма были повреждены. Учитывая связь между дефектами митохондрий и энергетической функцией, можно определить особенную подверженность поражению нервной и мышечной систем.

Среди характерных признаков патологии мышечной системы можно распознать:

  • Ограничение или полное отсутствие двигательной активности в связи с невозможностью выполнять обычные действия из-за ослабленности мышц или, как называют это состояние – миопатии.
  • Пониженное артериальное давление.
  • Болевой синдром или мышечные спазмы, сопровождаемые сильными болями.

У детей в первую очередь проявляется головная боль, интенсивная и повторяющаяся рвота, ослабленность после минимальных физических нагрузок.

Если речь идёт о поражении нервной системы, то здесь имеют место быть следующие проявления:

  • отставание в психомоторном развитии;
  • неспособность выполнять действия, с которыми ребёнок справлялся ранее – регресс развития;
  • судорожные припадки;
  • периодические проявления апноэ и тахипноэ;
  • частая потеря сознания и впадение в кому;
  • изменения на уровне кислотно-щелочного баланса;
  • изменение походки.

У детей старшего возраста можно заметить онемение, паралич, потерю чувствительности, инсультоподобные приступы, патологии в виде непроизвольных движений и т. д.

Затрагивание органов чувств выражается в ухудшении зрительной функции, птозах, катарактах, дефектах глазной сетчатки и поля зрения, ухудшении слуха или полной глухоте нейросенсорного характера. Поражение органов в детском организме проявляются в виде проблем с сердцем, печенью, почками, поджелудочной железой. Что касается болезней, связанных с эндокринной системой, то здесь отмечаются:

  • отставание в росте и половом развитии,
  • пониженная выработка глюкозы организмом,
  • дисфункция щитовидки,
  • прочие проблемы с метаболизмом.

Диагностика митохондриальных заболеваний у ребёнка

Для того чтобы диагностировать наличие митохондриальных болезней, врач изучает анамнез, проводит физикальный осмотр, исследуя в первую очередь силу ребёнка и его выносливость. Дополнительно назначается обследование у невропатолога, включая оценку зрения, рефлексов, речевой и познавательной способностей. С помощью специализированных анализов – мышечная биопсия, МРС и так далее, – подтверждают имеющиеся подозрения. Также выполняется компьютерная и магнитно-резонансная томография и ДНК-диагностика с консультацией у генетиков.

Осложнения

То, чем опасны дефекты митохондрий, зависит от вида болезни. Например, при поражении мышечной системы, имеет место быть полный паралич и инвалидизация, в том числе интеллектуальный регресс.

Что можете сделать вы

Первая помощь со стороны родителей зависит от того, в чём именно заключаются проявления заболевания. В любом случае, при наличии малейших подозрений и отклонений от нормы, необходимо обратиться к специалисту и узнать, что делать с болезнью при её наличии.

Что делает врач

Вне зависимости от вида болезни, лечить её можно методом введения препаратов, нормализующих энергетический обмен. Также, ребёнку назначается симптоматическое и специализированное лечение в порядке, установленном для конкретного заболевания. Вылечить патологии быстрее или нормализовать состояние пациента помогают физические упражнения и физиотерапевтические процедуры.

Профилактика

Предотвратить митохондриальные болезни невозможно, так как они происходят на генетическом уровне. Единственный способ, позволяющий несколько минимизировать риски – это ведение здорового образа жизни без вредных привычек.

Автореферат и диссертация по медицине (14.00.09) на тему: Эффективность применения янтарной кислоты в комплексном лечении детей с митохондриальными энцефаломиопатиями и другими заболеваниями с митохондриальной дисфункцией

Автореферат диссертации по медицине на тему Эффективность применения янтарной кислоты в комплексном лечении детей с митохондриальными энцефаломиопатиями и другими заболеваниями с митохондриальной дисфункцией

На правах рукописи

Василев Станимир Цветанов

ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ ЯНТАРНОЙ КИСЛОТЫ В КОМПЛЕКСНОМ ЛЕЧЕНИИ ДЕТЕЙ С МИТОХОНДРИАЛЬНЫМИ ЭНЦЕФАЛОМИОПАТИЯМИ И ДРУГИМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ С МИТОХОНДРИАЛЬНОЙ ДИСФУНКЦИЕЙ

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Работа выполнена в Московском ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательском институте педиатрии и детской хирургии Министерства Здравоохранения Российской Федерации и в Научном центре здоровья детей РАМН.

Научные руководители: доктор медицинских наук,

профессор Л.З.Казанцева доктор биологических наук C.B. Петричук Официальные оппоненты: доктор медицинских наук,

профессор М. И. Баканов доктор медицинских наук, доцент М.Ю. Никанорова

Ведущее научное учреждение: Российский государственный медицинский университет

Защита диссертации состоится «_»_2002г. в ,

час_мин. на заседании Диссертационного Совета Д- 084.15.01 приНИИ

педиатрии и детской хирургии МЗ РФ по адресу: 127412, г. Москва, ул. Талдомская, д.2.

С диссертации можно ознакомится в библиотеке института. Автореферат разослан «_»_2001 г.

Ученый секретарь Диссертационного Совета

кандидат медицинских наук 3. К. Землянская

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Митохондриальные болезни — гетерогенная группа заболеваний, обусловленных генетическими, структурными и биохимическими дефектами митохондрий (De Vivo D.C., 1990, Вельтищев Ю.Е., 1998). Митохондрии, как основная система генерации АТФ в организме, одни из первых реагируют на изменения энергетических требований органов в условиях патологии. Исследование этих важнейших клеточных органелл (их количество, локализация, структура, активность внутримитохондриальных ферментов), анализ изменения их состояния в течение заболевания, позволяет оценить тяжесть энергетических нарушений, прогнозировать развитие патологического процесса.

Наличие дисфункции митохондрий доказано при самых различных заболеваниях детей и взрослых, таких как синдромы дыхательных расстройств новорожденных, внезапной детской смерти, хронического утомления, а также при мигрени, токсикозе беременности. Патология митохондрий описана и при ряде болезней и синдромов генетического происхождения — туберозный склероз, синдром Элерса-Данлоса, Ретта (Семячкина А.Н., 1995).

Постоянное увеличение частоты заболеваний, обусловленных дефектами митохондрий в связи с высокими возможностями современных методов диагностики, разнообразие митохондриальных дисфункций и нарушений заставляют обратить серьезное внимание на диагностику и эффективное лечение этих состояний.

Несмотря на многочисленные работы, посвященные изучению патогенетических механизмов и клинических особенностей митохондриальных нарушений, вопросы их лечения до настоящего времени остаются мало изученной проблемой.

Сведения об эффективности терапии митохондриальных нарушений весьма неоднозначны и противоречивы.

В связи с этим, остается актуальной проблема поиска новых средств для коррекции метаболических и энергетических нарушений при митохондриальных болезнях. Большой интерес представляет препарат янтарной кислоты — лимонтар. Янтарная кислота играет центральную роль в энергетическом обмене организма (Кондрашова М.Н., 1997). Ее применение в комплексе с другими лечебными и лекарственными воздействиями оказалось полезным при многих заболеваниях. Среди .терапевтических эффектов янтарной кислоты известны: детоксикационный, диуретический, антиоксидантный, антистрессовый, антигипоксический, противоопухолевый (Хазанов В.А., 1993).

У больных с митохондриальными нарушениями энергетический аппарат клетки постоянно находится в состоянии повышенной активности для компенсации гипофункции аномальных митохондрий. Участвуя в быстром пути цикла Кребса, янтарная кислота может обеспечить стабильность энергетического обмена, повысить эффективность функционирования нормальных митохондрий (Кондрашова М.Н., 1997). Входя в состав 2 комплекса дыхательной цепи, сукцинат может быть эффективен при дефектах 1 комплекса, обеспечивая бесперебойный перенос электронов на 3 и 4 комплексы. Эффективность окислительного фосфорилирования янтарная кислота может повысить также за счет выраженного поддержания мембранного потенциала митохондрий (Саакян И.Р., 1990). Мощный поток электронов в дыхательную цепь от сукцинатдегидрогеназы устраняет ведущую, но мало учитываемую компоненту метаболического ацидоза — отставание АТФ-синтазной реакции от АТФ-азной нагрузки; с высокой антиокислительной мощью системы окисления янтарной кислоты связано и сильное антиоксидантное действие сукцината (Маевский Е.И., 1997).

Эти данные свидетельствуют о том, что в комплексе терапии, направленной на повышениё®: резистентности и функциональной активности клеток, субстраты цикла Кребса и, в частности янтарная кислота, занимают ключевое положение, в значительной степени определяя эффективность фармакотерапии в целом.

Исходя из вышеизложенного, была обоснована цель исследования:

На основе анализа состояния энергетического обмена доказать клиническую эффективность применения препарата лимонтар в качестве метода патогенетической коррекции при комплексной терапии детей с митохондриальными нарушениями.

Для достижения поставленной цели в работе решались следующие

1. Проанализировать клинические, биохимические и морфологические признаки митохондриальной недостаточности у детей с различными формами митохондриальных нарушений: митохондриальными энцефаломиопатиями, кардиомиопатиями, синдромом Элерса-Данлоса.

2. Оценить состояние энергетического обмена у детей с митохондриальными нарушениями.

3. Исследовать значимость и информативность параметров цитохимического анализа и морфометрии лимфоцитов периферии-ческой крови в оценке тяжести и динамики состояния детей с митохондриальными нарушениями в процессе комплексного лечения, включающего применение лимонтара.

4. Доказать эффективность использования лимонтара в комплексной терапии детей с митохондриальными нарушениями.

5. Исследование сравнительной эффективности использования лимонтара при различных состояниях, сопровождающихся нарушениями энергетического обмена.

Научная новизна работы.

Научно обоснована и доказана высокая клиническая эффективность препарата янтарной кислоты лимонтар в комплексной терапии митохондриальных заболеваний.

Доказана информативность цитоморфометрического анализа ферментного статуса лимфоцитов периферической крови в оценке тяжести состояния детей с митохондриальными нарушениями и анализе эффективности метаболического препарата лимонтар на фоне комплексного лечения митохондриальных нарушений.

Полученные результаты использовались при разработке утвержденных министерством здравоохранения Российской Федерации методических указаний «Основные методы лечения детей, страдающих митохондриальными заболеваниями» и пособия для врачей «Принципы терапии вторичной митохондриальной недостаточности у детей с врожденными и наследственными метаболическими болезнями».

Назначение лимонтара для коррекции митохондриальных нарушений повысило эффективность применяемой комплексной терапии, позволило снизить дозу используемых лекарственных препаратов, что способствовало улучшению социальной адаптации больных детей и снижению стоимости курса лечения у каждого ребенка.

Апробация и внедрение в практику.

Результаты исследования внедрены в клиническую практику отделения врожденных и наследственных заболеваний детского возраста Московского НИИ педиатрии и детской хирургии МЗ РФ (директор — д.м.н., профессор А. Д. Царегородцев, главный врач — к.м.н. Г. Г. Осокина) и Детского Центра Минздрава РФ по наследственной патологии.

Материалы диссертации доложены и обсуждены на 1-ой Всероссийской конференции «Клинические и патогенетические проблемы нарушений

клеточной энергетики /митохондриальная патология/» (г. Москва, 1999), II Российском форуме «Мать и дитя» (Москва, 2000), Всероссийском рабочем совещании «Митохондрий в патологии» (г. Пущино, 2001), VIII Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2001).

По теме диссертации опубликовано 18 печатных работ, из них — 3 в зарубежной печати, 1 работа дана в печать.

Объем и структура диссертации.

Диссертация изложена на_страницах машинописного текста и состоит

Другие публикации:  Куры породы бентамка описание

из введения, обзора литературы, двух глав собственных исследований, общего заключения с обсуждением, выводов, практических рекомендации и списка цитируемой литературы (всего 186 названий, из них 97 на русском языке). Диссертация содержит_рисунков и_таблиц.

П. ХАРАКТЕРИСТИКА ОБСЛЕДОВАННЫХ ДЕТЕЙ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Комплексно обследовано 29 детей, которые составили 3 группы. В 1 группе наблюдалось 12 детей с различными формами митохондриальной энцефаломиопатии(1-е синдромом Барта, 1 — с З-гидрокси-З-метилглутаровой ацидемией, 1-е дефицитом ацил-КоА-дегидрогеназы жирных кислот со средней длиной цепи, 1 — с синдромом МЕШУ7, 8-е неклассифицированной митохондриальной энцефаломиопатией); во второй группе — 10 детей с митохондриальной кардиомиопатией (5-е дилатационной и 5 — с гипертрофической кардиомиопатией); в 3 группе — 7 детей с синдромом Элерса-Данлоса. Возраст детей колебался от 2 до 15 лет. Лимонтар назначался на фоне базисной терапии в дозе 10 мг/кг массы в сутки в течение 10 дней, в 3 -4 приема после еды, по возможности — за 30 — 40 минут до предполагаемой физической нагрузки; последний прием — до 16 часов дня.

В качестве контроля использовалась опенка клинических и биохимических показателей этих же детей на фоне базовой терапии L-карнитином 250 — 750 мг/сут, коэнзимом Q10 — 30 — 120мг/сут, витаминами группы В, никотинамидом, аскорбиновой кислотой, витамином Е, липоевой кислоты в возрастных дозировках до начала приема лимонтара. Цитоморфометрические показатели обследуемых детей сравнивались с контрольными значениями у 12 детей 1 группы здоровья.

В работе был использован комплекс клинико-генеалогических, клинических, функциональных, биохимических и морфометрических методов исследования.

Клинико-генеалогическое, клиническое, функциональное и биохимические исследования проведены в отделах врожденных и наследственных заболеваний детского возраста и сердечно-сосудистой системы и включало:

— изучение акушерского анамнеза и психомоторного развития детей в

— исследование общего соматического статуса больных.

Комплексная оценка клинического состояния обследованных детей включала определение параметров физического развития с учетом перцентильных шкал Стюарта, состояния центральной нервной системы на основе данных о нервно-психическом развитии, наличии двигательных нарушений, в том числе оценка мышечного тонуса по бальной шкале, рефлексов, координаторных проб, наличия судорожного синдрома и др. Широко применялись данные функциональных методов исследования центральной нервной (эхо- и электроэнцефалографии, по показаниям -магнитно-резонансной и компьютерной томографии), сердечно-сосудистой (электро- и эхокардиографии), органов пищеварительной и эндокринной систем (данные ультразвукового исследования). Проводилась оценка тяжести

состояния детей с митохондриальными кардиомиопатиями на основе разработанных нами критериев по параметрам электрокардиограммы и эхокардиографии в баллах.

Биохимические методы исследования включали определение уровней молочной (методом Баркера и Саммерсона в модификации Л.Ф. Марченко) и пировиноградной (методом Мюллера в модификации Л.Ф.Марченко) кислот в сыворотке крови натощак, а также после стандартной нагрузки глюкозой из расчета 1,75 г/кг массы тела на 60 и 180 минутах; аминокислотного спектра крови и мочи на аминокислотном анализаторе Hitachi с помощью ионнообменных смол; содержания продуктов перекисного окисления липидов -гидроперекисей (по В.Б. Гаврилову и соавт. 1983) и малонового диальдегида (по I.Minoru, 1978) в плазме крови. Исследование спектра органических кислот и их метаболитов в моче осуществлялось методом газожидкостной хроматографии — хромато-масс-спектрометрия на аппарате НР-5995 (Хьюлетт Паккард).

При патоморфологическом исследовании биоптатов четырехглавой мышцы бедра с помощью световой гистохимии выявлялись общие гистологические изменения (окраски гематоксилином и эозином, по методам Гомори-Энгела, Маллори, Ван Гизона), наличие феномена шероховатых красных волокон (RRF), активность сукцинатдегидрогеназы (окраска по Нахласу) и цитохромоксидазы (окраска по Берстону), косвенные признаки митохондриальной недостаточности (включения гликогена — окраска по Шабадашу, кальция — по Коссу, липидов — окраска Суданом черным по Лизону). Для ультраструктурного анализа образцы ткани обрабатывали стандартными методами и изучали в электронном микроскопе ЭМ-125 и ЭМ-109.

Для оценки изменений митохондриальной активности на фоне комплексного лечения детей с митохондриальными нарушениями особо актуальным представлялся анализ ферментного статуса лимфоцитов периферической крови, адекватно отражающего состояние мышечной ткани,

органов и систем при различных заболеваниях. Выявлена корреляция ферментного статуса лимфоцитов с параметрами гистологических исследований, активностью значимых для определенного заболевания ферментов. По данным литературы, наиболее достоверно характеризуют энергообеспечение тканей и органов два фермента лимфоцитов: сукцинатдегидрогеназа и а-глицерофосфатдегидрогеназа.

Цитохимическое исследование выполнялось в лаборатории цитохимии Научного центра здоровья детей РАМН. Проводилось определение активности сукцинатдегидрогеназы и альфа-глицерофосфатдегидрогеназы лимфоцитов периферической крови, параметров распределения популяции лимфоцитов по активности этих ферментов и морфометрия лимфоцитов по активности сукцинатдегидрогеназы. Цитоморфометрические параметры у каждого обследуемого ребенка определялись трижды: до начала лечения лимонтаром, через 40 минут после первого приема и после 10-дневного курса этого препарата.

Статистическая обработка результатов исследований проведена на персональном компьютере IBM PC Р655 с применением методов вариационной статистики, регрессионного анализа и математического моделирования. Использованы стандартные пакеты статистических программ «Statgraphics 2.6», «Excel 7.0». Доверительный интервал для средних величин вычислялся с заданным уровнем достоверности 0,95.

III. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 1. Исходные клинические, биохимические, морфологические и цитоморфометрические данные

Результаты исследования показали, что отставание в росте и дефицит массы тела наблюдались как среди детей 1, так и 2 группы, но более выраженное снижение физического развития отмечалось у детей с митохондриальными кардиомиопатиями (2 группа). В первой группе задержка

роста отмечалась у 2 из 12 детей, а дефицит массы — у 3 из 12-ти. У одного ребенка отмечено ожирение II степени. Во второй группе 6 из 10 детей имели физическое развитие ниже среднего, у 2 имел место дефицит массы при нормальном росте. В 3 группе (синдром Элерса-Данлоса) отмечалось явное преобладание дефицита массы тела по отношению к росту — у 3 из 8 детей. У большинства обследованных детей выявлялась низкая переносимость физической нагрузки. Миопатические проявления были более выражены в первой группе (у 11 из 12 детей, 3-4 балла), чем во 2 и 3 группах (у всех детей, 1-2 балла). Координаторные нарушения носили более грубый характер у большинства (8 из 12-ти) детей 1 группы в виде мимопопаданий при выполнении координаторных проб, неустойчивости или полной невозможности стояния в позе Ромберга. Среди детей 2 (1 из 10) и 3 (5 из 8) групп эти нарушения проявлялись в виде моторной неловкости, неуклюжей походки, интенции при выполнении координаторных проб и затруднений при выполнении заданий, связанных с точными и мелкими движениями (собирание мозаики, рисование и др.). В нервно-психическом состоянии более тяжелые изменения были отмечены у детей 1 группы в виде частых мигренеподобных головных болей, снижений интеллекта различной степени выраженности (у 9 из 12 детей), тогда как во 2

и 3 группах имелись преимущественно легкие психологические расстройства с эмоциональной лабильностью, сниженной концентрацией внимания, периодическими приступами головных болей и лишь у 1 девочки с синдромом Элерса-Данлоса была зарегистрирована задержка нервно-психического развития. У 5 из 12 детей 1 группы имели место повторные тонико-клонические судороги, у 2 детей из 1 и 1 — из 3 группы в анамнезе зарегистрированы фебрильные судороги.

Опущение верхнего века встречалось значительно чаще в первой группе (более чем у половины детей) и было выражено ярче, чем во второй и третьей группах. Среди детей с наследственными заболеваниями соединительной ткани

(3 группа) птоз век выявлен только у 1 мальчика, причем он усугублялся при физической нагрузке.

Нарушения зрения проявлялись чаще и тяжелее в первой группе — у 10 из 12 детей. У одного ребенка была диагностирована тапеторетинальная абиотрофия сетчатки, у другого — врожденная точечная катаракта, у двоих -частичная атрофия зрительного нерва. Во второй группе патология зрения имела место у 2 детей из П). У одного из них выявлена частичная атрофия зрительного нерва, сходящееся косоглазие, нистагм. В третьей группе аномалии рефракции диагностированы в 3 случаях из 8-ми — у 2 детей была миопия разной степени тяжести, у одного — гиперметропия. Нейросенсорная тугоухость подтверждена только у 1 ребенка из 12 в 1 группе.

Изменения сердечно-сосудистой системы носили разноплановый характер. Наиболее тяжелыми они были во второй группе (дети с митохондриальными кардиомиопатиями). 5 из 10-ти детей страдали гипертрофической, остальные — дилатационной кардиомиопатией. Тяжесть их состояния определялась выраженностью ишемических изменений сердечной мышцы и степенью нарушений ритма. Нами разработаны критерии бальной оценки выраженности изменений, выявляемых на ЭКГ и эхокардиографии, на которых основывалось определение степени тяжести заболевания (табл.1).

У всех 10 детей имелись изменения на ЭКГ: признаки гипертрофии (перегрузки) левого желудочка с высоким вольтажем комплексов С^Б (у 8-ми); нарушение процессов реполяризации разной степени выраженности -сглаженность зубца Т (у 5), отрицательный зубец Т (у 1), депрессия сегмента БТ ниже изолинии (у 5); признаки рубцовых изменений миокарда — снижение вольтажа и расщепление зубца Яу6 (у 2-х); нарушения ритма — единичные суправентрикулярные экстрасистолы (у 1), би-тригеминия (у 1), залповые желудочковые экстрасистолы (у 3-х).

По данным эхокардиографии у 5-ти больных из 10 отмечалось увеличение полости левого желудочка, гипокинезия задней стенки левого

Таблица 1. Критерии оценки изменений на ЭКГ и эхо-КГ в баллах.

Признак 0 1 балл 2 балла 3 балла

Экстрасис толия нет единичные суправентри- кулярные аллоритмия /би-, тригеминия/ желудочковые экстрасистолы, желудочковая тахикардия

Внутриже- лудочко- вые блокады нет неполная блокада правой ножки пучка Гисса, одной из ветвей левой ножки полная блокада правой или левой ножки пучка Гисса бифасцикулярные блокады

вт-т нарушени я нет сегм. БТ + 1-2мм или на изолинии БТ ниже изолинии на 34мм и Т отрицательный глубокий Б 30 мм деформация компл. ОЯБ по типу С^ /рубцовые изменения/

КДДЛЖ норма 4 мм от нормы 5 — 8 мм от нормы большее отклонение от нормы

ФВ норма снижение на 0,06 от нормы снижение на 0,06-0,12 от нормы большее отклонение от нормы

ТЗСЛЖ норма 3 мм от нормы 3 — 5 мм от нормы большее отклонение от нормы

ТМЖП норма 3 мм от нормы 3 — 6 мм от нормы большее отклонение от нормы

КДЦЛЖ- конечно-диастолическии диаметр левого желудочка ФВ — фракция выброса

ТЗСЛЖ — толщина задней стенки левого желудочка ТМЖП — толщина межжелудочковой перегородки

желудочка и межжелудочковой перегородки, снижение величины фракции выброса. У 3 дилатация левого желудочка сочеталась с дилатацией полости левого предсердия. Признаки гипертрофии левого желудочка (увеличение толщины задней стенки и межжелудочковой перегородки) выявлены у 6 детей, у 2 из них она была асимметричной с обструкцией выходного тракта левого

желудочка и переднесистолическим движением передней створки митрального клапана.

Среди детей с митохондриальными энцефаломиопатиями (1 группа) у 2 детей выявлена гипертрофическая кардиомиопатия, у 1 — атриовентрикулярная блокада 1-2 степени. У остальных регистрировались более легкие изменения в виде блокады правой ножки пучка Гисса, нарушения реполяризации и метаболических процессов в миокарде, пролапс митрального клапана.

У всех 8 обследованных третьей группы (синдром Элерса-Данлоса) определялся пролапс митрального клапана, у 6 детей выявлялись нарушения реполяризации и процессов проведения в миокарде.

Анализ эндокринных нарушений показал, что у 7 детей с митохондриальной энцефаломиопатией (1 группа), а также — у 4-х с митохондриальной кардиомиопатией (2 группа) была нарушена толерантность к глюкозе. В третьей группе склонность к гипогликемии выявлена только у 1 из обследованных пациентов. У 1 девочки из 1 группы и у 1 с синдромом Элерса-Данлоса отмечалась задержка полового развития с нарушением формирования вторичных половых признаков и становления менструальной функции.

Патология со стороны желудочно-кишечного тракта (боли в животе, рвоты, склонность к запорам) чаще выявлялась в1-у9из12,ивЗ группе — у 7 из 8-ми детей. У трех детей 1 группы была выявлена гепатомегалия.

Проведенное биохимическое обследование выявило общепризнанные биохимические критерии митохондриальной недостаточности: повышение уровней лактата и пирувата в сыворотке крови у детей всех групп (рис.1) и продуктов перекисного окисления липидов — гидроперекисей и малонового диальдегида в плазме крови у детей с митохондриальными энцефаломиопатиями (у 8 и 6 детей из 12 соответственно) и с синдромом Элерса-Данлоса (у 6 и 4 из 8, соответственно).

Морфологическое исследование биоптатов скелетной мышцы показало присутствие у всех обследованных детей признаков митохондриальной

недостаточности — феномен 1ШР( у 10 из 12 детей 1-ой группы, во 2 группе у всех 10 детей и в 3 — у 6 из 8 детей), нарушение распределения кальция, гликогена и липидов (в 1 группе у 9 из 12, во 2 — у 7 из 10 и в 3 — у 6 из 8 детей), снижение активности ферментов сукцинатдегидрогеназы и цитохромоксидазы в мышечной ткани (в 1 группе — у 5 детей, во2-у2из10ивЗ-у1из8 детей).

Таким образом, анализ клинических, биохимических и морфологических признаков выявил сходство по основным симптомам митохондриальных дисфункций со стороны нервной, мышечной и сердечно-сосудистой систем, а также, по биохимическим и морфологическим параметрам между тремя группами детей с митохондриальными нарушениями (первичные митохондриальные энцефаломиопатии, митохондриальные кардиомиопатии и синдром Элерса-Данлоса). Это подтверждает уже имеющиеся данные о полисистемном характере нарушений и наличии признаков митохондриальных нарушений при синдроме Элерса-Данлоса.

Рис.1. Содержание молочной и пировиноградной кислот и их соотношение в исследовавшихся группах.

Анализ результатов исследования популяции лимфоцитов по активности сукцинатдегидрогеназы и а-глицерофосфатдегидроге-назы показал следующее. По сравнению с контрольной группой, у большинства детей всех 3 групп определялись снижение средней активности сукцинатдегидрогеназы и альфа-глицерофосфатдегидро-геназы, наличие отдельных клеток с очень высокой или очень низкой активностью, уменьшение количества клеток с типичной активностью. У 3 детей 1 группы и у 2 второй и третьей группы определялось повышение средней активности сукцинатдегидро-геназы, но во всех этих случаях оно сочеталось с нарушением других параметров распределения. В 1 группе такие нарушения определялись у 11 из 12 детей, во второй — у всех 10 детей, в группе с синдромом Элерса-Данлоса — также у всех 7 обследованных детей.

Достоверных различий по параметрам цитохимического анализа между группами обследованных детей не выявлено.

Анализ изображения клетки (морфометрия лимфоцитов) позволил более детально оценить состояние митохондриального аппарата клеток детей с митохондриальными нарушениями, по сравнению с контрольной группой.

Проведенный анализ показал, что в первой группе (дети с митохондриальными энцефаломиопатиями) отмечалось меньшее количество гранул (рис.2). Причем, было снижено количество как отдельно лежащих гранул, так и их конгломератов. Наличие скоплений гранул объяснялось сгруппированием аномальных митохондрий с целью повышения эффективности их работы. Отдельно лежащие гранулы имели меньшую площадь и периметр по сравнению с аналогичными параметрами контрольной группы. Оптическая плотность гранул, характеризующая степень активности фермента сукцинатдегидрогеназа, была снижена как для отдельно лежащих гранул, так и для их конгломератов (рис.2).

Для детей второй группы (с митохондриальными кардиомиопатиями) были характерны аналогичные изменения морфометрических параметров.

Рис. 2. Функциональная активность митохондрий при выявлении сукцинатдегидрогеназы

Число очагов ферментной реакции в лимфоцита

Общее число депозитов было уменьшено, снижено количество отдельно лежащих гранул и конгломератов и их оптическая плотность. В отличие от первой группы, у этих детей выявлено увеличение общей площади и периметра кластеров, что расценено как результат тенденции скопления митохондрий для компенсации гипофункции аномальных органелл. У детей с синдромом Эдерса-Данлоса при сниженном общем количестве гранул, определялось увеличение площади и периметра гранул и конгломератов. Однако, их оптическая плотность была ниже, чем в контрольной группе.

Другие публикации:  Что можно делать беременным при простуде

Таким образом, результаты морфометрического исследования лимфоцитов свидетельствовали, что для всех трех групп детей были характерны признаки снижения активности энергетических процессов в митохондриях. Эти признаки были наиболее выражены у детей с митохондриальными энцефаломиопатиями (первая группа).

Во второй группе наблюдалась слабо выраженная компенсаторная реакция — увеличение площади и периметра конгломератов митохондрий. Компенсаторные изменения были наиболее отчетливы в третьей группе — там определялось увеличение периметра и площади не только конгломератов, но и отдельно лежащих гранул.

У детей всех групп была выявлена корреляция цитохимических характеристик лимфоцитов и гистохимических параметров скелетной мышечной ткани (КЯР в % и в баллах, значения митохондриального индекса). Ферментный статус лимфоцитов периферической крови достоверно отражал (на 53 — 85%) состояние скелетных мышц у детей с митохондриальными нарушениями. Квадрат множественного коэффициента корреляции был выше, если учитывались одновременно и цитохимические, и морфометрические критерии. То есть, популяционные и клеточные параметры в комплексе более достоверно отражали состояние скелетных мышц у детей с митохондриальными заболеваниями.

Исследованы корреляционные связи между клиническими и лабораторными показателями (в баллах или абсолютных значениях) у 25 детей с митохондриальными нарушениями и цитохимическими параметрами. Было выявлено, что по значениям цитохимических параметров можно достоверно судить о выраженности основных клинических, лабораторных и инструментальных характеристик у детей с митохондриальными заболеваниями. Наиболее выражена связь цитохимических параметров с состоянием мышечного тонуса (112=0.65), нарушениями мелкой моторики (112=0.69), четкостью выполнения координационных проб (112=0.88), нарушениями зрения (112=0.69), уровнем психического развития (112=0.79). Значения цитохимического анализа достоверно отражали выраженность изменений на электрокардиограмме (112=0.77), на эхо-энцефалоскопии (112=0.89), уровень сахара в крови и склонность к гипогликемии (112=0.73), уровень лактата в крови (1*2=0.65).

Во второй группе, у детей с митохондриальными кардиомиопатиями были исследованы корреляционные связи цитоморфометрических показателей с параметрами электрокардиограммы.

Основные цитоморфометрические показатели (количество депозитов, их площадь, оптическая плотность и разнородность по оптической плотности, площадь и оптическая плотность отдельно лежащих гранул, количество кластеров, интегральная оптическая плотность депозитов) достоверно коррелировали с параметрами ЭКГ и эхо-КГ, определяющими тяжесть состояния детей с митохондриальными кардиомиопатиями (внутрижелудочковые блокады, высота зубцов И. и Т в У6, наличие экстрасистолии, величина фракции выброса, БТ-Т нарушения, конечно-диастолический диаметр левого желудочка). Множественный коэффициент корреляции составлял от 0,23 до 0,51.

Таким образом, нами доказано, что цитохимический анализ и морфометрия лимфоцитов периферической крови достоверно и полно отражали

тяжесть состояния детей с митохондриальными нарушениями. Информативность, простота и доступность этого метода позволили нам использовать его в качестве основного критерия контроля эффективности применения янтарной кислоты в комплексной терапии детей с митохондриальными нарушениями.

2. Оценка результатов комплексного лечения детей с митохондриальными нарушениями с применением лимонтара.

Клиническое состояние детей после лечения лимонтаром оценивалось по следующим критериям:

— повышение физической активности;

— повышение толерантности к физической нагрузке;

— купирование некоторых специфических для конкретного пациента симптомов /или уменьшение степени их выраженности/: судорог, головной боли, атаксии, нарушений мелкой моторики, дефицита веса и др.

Среди 12 детей первой группы (митохондриальная энцефаломиопатия) улучшение самочувствия наблюдалось у 8 детей. У 9 из них отмечено повышение физической активности, у 10 детей улучшилась толерантность к физической нагрузке. В 2 случаях из 12 в результате лечения лимонтаром купировались головные боли и интенция при выполнении координационных проб.-Наблюдалось, наряду с этим, прекращение судорожных приступов (у 1-го), исчезновение дизартрии и нарушении мелкой моторики (у 1-го). Более чем у половины детей (7 из 12) констатировано уменьшение выраженности некоторых симптомов, таких как: тошнота и рвоты, судорожные приступы, атаксия, эпизоды сонливости, координаторные нарушения. У 2 из 12 детей

улучшение клинического состояния после курса лечения лимонтаром не наблюдалось.

Таким образом, среди детей с митохондриальной энцефаломиопатией в результате лечения лимонтаром выявлена выраженная положительная динамика у 3 из 12, умеренно выраженное улучшение — у 7 и отсутствовали изменения клинического состояния у 2 из 12 детей.

У детей с митохондриальной кардиомиопатией (вторая группа), в связи со скудностью экстракардиальной симптоматики, динамика клинического состояния была менее выражена. Улучшение самочувствия отмечалось у половины детей (5 из 10). У 3 из 10 детей после курса лимонтара купировались кардиалгии, у половины детей уменьшилась интенсивность или полностью исчезли головные боли и головокружения. Следует отметить, что в связи с тем, что детям с кардиомиопатией физическая нагрузка противопоказана, у них не оценивались физическая активность и толерантность к физической нагрузке. В итоге, во 2 группе положительная динамика клинического состояния была выявлена у 6 из 10 детей, а у 4 клиническое состояние оставалось без изменений.

Среди семи детей с синдромом Элерса-Данлоса (ретья группа)улучшение самочувствия отмечено у 5. Повышение физической активности и толерантности к физической нагрузке наблюдалось у всех обследованных. В результате лечения лимонтаром купировались головные боли и головокружения у 3, уменьшилась выраженность птоза, расстройства чувствительности конечностей у одного ребенка. В целом, положительная динамика была выявлена у всех детей (7) с синдромом Элерса-Данлоса, причем выраженной динамика была у 3 детей, а у остальных 4 — умеренно выраженной.

Подводя итоги результатам воздействия лимонтара на комплексное состояние 29 детей с митохондриальными нарушениями, можно отметить, что улучшение клинического состояния наблюдалось у большинства из них — 24 из

29. Это улучшение расценивалось как выраженное у 6 детей, как умеренно выраженное — у 18; у 5 детей клиническое состояние оставалось без динамики.

Ряд биохимических критерий митохондриальной недостаточности: уровень лактата, пирувата, а также продуктов перекисного окисления липидов (малонового диальдегида, гидроперекисей), оцененных после курса лимонтара, не показали достоверных изменений.

Анализ параметров ферментного статуса лимфоцитов после 10-дневного курса лечения лимонтаром на фоне базисной терапии показал, что произошло повышение функциональной активности митохондрий — увеличились площадь и оптическая плотность всех депозитов, а также количество конгломератов (рис. 3).

Сравнение параметров цитоморфометрического исследования лимфоцитов здоровых детей и больных с митохондриальными нарушениями выявило, что после курса лечения метаболическим препаратом лимонтар, митохондриальный аппарат клеток больных детей приблизился по вышеуказанным параметрам к состоянию митохондрий здоровых детей, хотя и не достиг их уровня. Все это свидетельствовало о положительном эффекте препарата лимонтар в комплексном лечении детей с митохондриальными нарушениями.

Наиболее выраженные положительные изменения параметров цитохимического анализа наблюдались в группах детей с первичными митохондриальными миопатиями и с митохондриальными кардиомиопатиями. У детей с синдромом Элерса-Данлоса, в связи с большим разбросом исходных значений цитоморфометрических показателей, изменения после курса лечения лимонтаром были менее выражены.

Исследование ферментного статуса лимфоцитов через 40 минут после первого приема лимонтара позволило нам исключить влияние на динамику цитоморфометрических параметров других препаратов, на фоне которых применялся лимонтар. Динамика цитохимических показателей через 40 минут

Рисунок 3. Динамика некоторых морфометрических показателей в процессе лечения лимонтаром детей с митохондриальиымн нарушениями.

Дету с митох. На рушениями /до лечения/

Через 40 мии. после первого приема

Оптическая плотность депозитов

Дети с митох. Нарушениями /до яе^ечия/

Через 40 после первого приема

была аналогична изменениям после полного курса лечения лимонтаром, но менее выражена.

Динамика цитоморфометрических параметров коррелировала с улучшением клинического состояния больных детей, выраженным в баллах.

Прогноз эффективности лимонтара можно осуществить на основе клинических признаков до лечения и цитохимических показателей. Эффективность прогноза терапии возрастает (до 94%), если объединить всю прогностическую информацию (исходный клинико-цитохимический статус и изменение клинических и цитоморфометрических показателей под действием препарата).

Таким образом, использование метаболического препарата лимонтар в комплексе терапевтических средств при лечении митохондриальных нарушений у детей оказывало положительное влияние на ряд клинических (повысило физическую активность и толерантность к физической нагрузке, уменьшило координаторные нарушения, снизило тяжесть и количество судорожных приступов, частоту и интенсивность головных болей) и энергетических (повышение функциональной активности митохондрий по данным цитоморфометрического исследования) проявлений митохондриальной недостаточности при митохондриальных энцефаломиопатиях, митохондриальных кардиомиопатиях и синдроме Элерса-Данлоса.

1. Анализ клинико-биохимических и морфологических данных выявил наличие митохондриальной дисфункции как при митохондриальных энцефаломиопатиях, так и у детей с митохондриальными кардиомиопатиями и наследственным заболеванием соединительной ткани (синдром Элерса-Данлоса).

2. Цитохимическими методами доказано наличие энергетической недостаточности у детей с митохондриальными нарушениями, в отличие от здоровых.

3. Изменения цитохимических и морфометрических показателей ферментного статуса лимфоцитов периферической крови достоверно и адекватно отражают степень тяжести состояния детей с митохондриальными нарушениями.

4. Доказана клиническая эффективность применения препарата янтарной кислоты лимонтар в комплексе терапевтических средств у детей с митохондриальными энцефаломиопатиями, митохондриальными кардиомиопатиями и синдромом Элерса-Данлоса.

5. По данным цитоморфометрического анализа улучшение клинического состояния детей с митохондриальными нарушениями после курса лечения лимонтаром коррелирует с повышением функциональной активности митохондрий. Сравнительный анализ эффективности применения лимонтара у детей с митохондриальными энцефаломиопатиями, митохондриальными кардиомиопатиями и синдромом Элерса-Данлоса не выявил достоверных различии.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ: В комплексе лечения детей с митохондриальными энцефаломиопатиями, митохондриальными кардиомиопатиями и синдромом Элерса-Данлоса, в клинической картине которых наблюдаются плохая переносимость физической нагрузки, миопатические проявления, координаторные нарушения, сопровождающиеся гиперлактат- и гиперпируватацидемией, нарушениями процессов перекисного окисления липидов и энергетического обмена, рекомендуется использование метаболического препарата лимонтар, содержащего янтарную кислоту.

С целью достижения более высокого эффекта от применения лимонтара, суточную дозу препарата необходимо разделить на 3 — 4 приема после еды, по возможности, за 30 — 40 минут до предполагаемой физической нагрузки; последний прием препарата — до 16 часов дня. Целесообразно хорошо растворить лимонтара в небольшом количестве теплой воды.

В комплексе методов, используемых для оценки тяжести и динамики состояния, а также, эффективности лечения препаратом лимонтар детей с митохондриальными нарушениями, следует применять цитоморфометрический анализ ферментного статуса лимфоцитов периферической крови.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ:

1. Поиск новых лекарственных препаратов для лечения митохондриальных энцефаломиопатий//Материалы Всероссийской научной конференции «Актуальные проблемы диагностики, лечения и профилактики наследственных заболеваний у детей». — Москва, 1998. — с.81. (соавт. Е.А.Николаева, C.B. Семячкина, Л.З.Казанцева).

2. Принципы лечения митохондриальных заболеваний у детей // Человек и лекарство: Мат. V Росс. нац. Конгресса — М., 1998. с. 338 (соавт. Е.АЛ1иколаева, П.А.Темин, C.B. Семячкина, Л.З.Казанцева).

3. Оценка эффективности препарата лимонтар у детей с митохондриальными нарушениями//Материалы V конгресса педиатров России «Здоровый ребенок». — Москва, 1999. — с. 95. (соавт. C.B. Петричук, Р.П.Нарциссов, Л.З.Казанцева, А.Б.Сафонов, Е.А.Николаева, C.B.Семячкина).

4. Здоровье, болезнь и лекарство // под ред. Р.П.Нарциссова — Москва, 1999. 57 с. (соавт. Петричук C.B., Сухоруков B.C., Шшценко В.М. и др.).

5. Комплексная терапия митохондриальных болезней детского возраста// Материалы 1-ой Всероссийской конференции «Клинические и патогенетические проблемы нарушений клеточной энергетики /митохондриальная патология/». — Москва, 1999. — с.45-46. (соавт. Е.А.Николаева, С.В.Семячкина, Л.З. Казанцева).

6. Морфометрия лимфоцитов в диагностике и контроле эффективности лечения детей с митохондриальными нарушениями // Материалы 1-ой Всероссийской конференции «Клинические и патогенетические проблемы нарушений клеточной энергетики /митохондриальная патология/». — Москва, 1999. — с. 18-19. (соавт. C.B. Петричук, Р.П.Нарциссов, В.С.Сухоруков, Е.А.Николаева, Л.З. Казанцева).

7. Цитохимическая диагностика митохондриальной патологии// Материалы 1-ой Всероссийской конференции «Клинические и патогенетические

проблемы нарушений клеточной энергетики /митохондриальная патология/». — Москва, 1999. — с.39-40. (соавт. Р.П.Нарциссов, С.В. Петричук, В.М.Шшценко, В.С.Сухоруков).

8. Принципы терапии вторичной митохондриальной недостаточности у детей с врожденными и наследственными метаболическими болезнями//Пособие для врачей. — Москва, 1999. — 18с. (соавт. Л.З. Казанцева, А.Н.Семячкина, В.С.Сухоруков, С.В.Семячкина). 9.Оценка эффективности препарата лимонтар у детей с митохондриальными нарушениями на основе цитохимического анализа/Шедиатрия, 1999, №4. — с. 74 — 78 (соавт. С.В. Петричук, Р.П.Нарциссов, Л.З. Казанцева, Е.А.Николаева, А. Б. Сафонов).

10. Диагностика и прогноз лечения митохондриальных болезней // Митохондриальные болезни /взгляд цитохимика/. Сб. статей под ред. Р.П.Нарциссова — Москва, 1999 — с. 11-32 (соавт. Петричук С.В., Николаева Е.А., Сухоруков B.C. и др.).

11. Диагностика и лечение на митохондриалните болести — проблеми и перспективи // В. Плевенска медицина. Плевен, 1999, № 4. — с. 7 — 8.

12. Efficacy of a limontar therapy in children with mitochondrial disorders // Abstr. of 4th European meeting on mitochondrial pathology, Cambridge, 16-19 September 1999. — Cambridge, 1999. — p. 227.(соавт. С.В.Петричук, Р.П.Нарциссов, Е.А.Николаева, Л.З.Казанцева).

13. Peripheral lymphocytes as a mitochondrial insufficiency test // Abstr. of 4th European meeting on mitochondrial pathology, Cambridge, 16-19 September 1999. — Cambridge, 1999. — p. 212. (соавт. В.С.Сухоруков, Р.П.Нарциссов, С.В.Петричук, Е.А.Николаева, Н.В.Клейменова, А.И.Клембовский, Л.З.Казанцева).

14. Роль янтарной кислоты в терапии митохондриальных болезней у детей // Педиатрия, 2000, №2. — с. 88 — 91 (соавт. Сафонов А.Б.).

15. Оценка степени поражения скелетных мышц у детей с митохондриальными нарушениями по морфометрии лимфоцитов//Наука и технология в России. Москва, 2000, №4. — с.23-25. (соавт. C.B. Петричук, И.А.Себелева, В.С.Сухоруков, Е.А.Николаева, Р.П.Нарциссов, JI.3. Казанцева).

16. Сравнительная диагностическая ценность анализа скелетной мышцы и лимфоцитов при митохондриальных болезнях//Архив патологии, 2000, том 62, №2, с. 19-22. (соавт. В.С.Сухоруков, Р.П.Нарциссов, С.В.Петричук, Е.А.Николаева, Н.В.Клейменова, А.И.Клембовский, Л.З.Казанцева).

17. Возможности цитоморфометрического анализа лимфоцитов в диагностике и лечении митохондриальных кардиомиопатии //Материалы Всероссийского рабочего совещания «Митохондрии в патологии». Пущино, 2001. — с.32-35. (соавт. C.B. Петричук, И.А.Себелева, JI.3. Казанцева, И.ВЛеотъева).

18. Метаболическая терапия наследственных болезней биоэнергетики у детей//Материалы VIII Российского национального конгресса «Человек и лекарство». Москва, 2001. — с. 413 (соавт. Е.А.Николаева, С.В.Семячкина, Е.В. Тозлиян, JI.3. Казанцева).