Результат пцр рнк гепатита с

HCV, РНК количественно, высокочувствительный метод [реал-тайм ПЦР]

Исследование, направленное на количественное определение РНК вируса гепатита С, оценки вирусной нагрузки методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени.

Синонимы русские

Вирус гепатита С (ВГС), количественное определение РНК, РТ-ПЦР [полимеразная цепная реакция в режиме реального времени], оценка вирусной нагрузки ВГС.

Синонимы английские

Hepatitis C Virus, Quantitative RNA, RT-PCR [polymerase chain reaction, real-time PCR], HCV Viral Load.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Единицы измерения

МЕ/мл (международная единица на миллилитр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Вирус гепатита С (ВГС, HCV) – это РНК-содержащий вирус семейства Flaviviridae, поражающий печень и приводящий к развитию хронического гепатита С, цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы.Существует шесть известных генотипов и множество субтипов вируса, которые имеют различное значение в прогрессировании заболевания и эффективности проводимой противовирусной терапии.

Современным методом диагностики ВГС является метод полимеразной цепной реакции в режиме реального времени. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это метод молекулярной диагностики, позволяющий на ранних этапах заболевания выявлять фрагменты генетического материала (РНК) вируса. Он характеризуется высокой чувствительностью и специфичностью и позволяет получить результат в сравнительно короткие сроки.

Метод ПЦР в режиме реального времени позволяет выявлять РНК вируса как качественно, так и количественно. Качественное выявление генетического материала вируса позволяет предположить присутствие вируса в исследуемом материале. Количественная же характеристика содержания РНК вируса гепатита С в исследуемом биоматериале, то есть определение вирусной нагрузки позволяет оценивать эффективность проводимой противовирусной терапии и прогнозировать течение заболевания с возможным развитием хронического процесса и осложнений.

Определение вирусной нагрузки на автоматизированном оборудовании позволяет анализировать все 6 (1-6) генотипов ВГС, имеет высокую клиническую специфичность теста (100 %) и практически полностью исключает возможные диагностические ошибки на всех стадиях анализа.

Эффективность лечения оценивается по количеству РНК до и во время терапии.При оценке эффективности проводимой противовирусной терапии и прогнозировании развития хронического процесса используется оценка количества вирусной РНК в диагностических единицах – МЕ/мл. Если концентрация вируса менее 8х10^5 МЕ/мл (800000 МЕ/мл), то проводимое противовирусное лечение эффективно, если выше, то необходимо рассмотреть альтернативные варианты терапии. Таким образом, вирусная нагрузка ВГС менее 8х10^5 МЕ/мл и определение генотипа ВГС являются наиболее важными параметрами в прогнозировании заболевания и оценки эффективности терапии.

Для чего используется исследование?

  • Для подтверждения диагноза «вирусный гепатит С», определения количественного содержания РНК вируса.
  • Для прогнозирования течения вирусного гепатита С.
  • Для оценки эффективности проводимой противовирусной терапии и решении вопроса о дальнейшей тактике лечения.

Когда назначается исследование?

  • При обнаружении РНК вируса гепатита С качественными методами или иными тестами для диагностики данного вируса.
  • При остром и хроническом вирусном гепатите С.
  • При планировании, во время и после окончания противовирусной терапии.
  • При оценке возможности развития хронического гепатита С, цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы печени.

Что означают результаты?

Референсные значения: не обнаружено.

Линейный диапазон концентраций РНК вируса гепатита С, определяемых детектирующим амплификатором в тесте –15-100000000 МЕ/мл.

  • не обнаружено – РНК гепатита С не выявлена или значение ниже предела чувствительности метода.

Причины положительного результата:

  • 100000000 МЕ/мл – РНК вируса гепатита С обнаружена в количестве выше линейного диапазона концентраций, необходимо указать используемое разведение.

* МЕ/мл – РНК вируса гепатита С обнаружена, низкая вирусная нагрузка (наиболее благоприятный прогноз течения заболевания и эффективности терапии);

> 8*10^5 МЕ/мл – РНК вируса гепатита С обнаружена, высокая вирусная нагрузка.

Что может влиять на результат?

  • Неправильный забор, хранение, транспортировка биоматериала.
  • Длительное хранение биоматериала до его поступления в лабораторию.
  • Замораживание биоматериала или его термическая обработка.



Также рекомендуется

[09-010] HCV, генотипирование, РНК [реал-тайм ПЦР]

[09-011] HCV, РНК [реал-тайм ПЦР]

[09-012] HCV, РНК количественно [реал-тайм ПЦР]

Кто назначает исследование?

Инфекционист, гепатолог, врач общей практики, терапевт, акушер-гинеколог, хирург.

Вирус гепатита С, определение РНК кол. (HCV-RNA, quantitative)

Опубликовано 23 Май 2018 пользователем admin

Горизонтальные табы

Вирус гепатита С (HCV) — РНК-содержащий вирус размером вириона 30-60 нм. Главным образом передается парентеральным путем (через инфицированную кровь и её компоненты). Инфицирование возможно при парентеральных манипуляциях, в том числе в медицинских учреждениях, включая оказание стоматологических услуг, через инъекционное оборудование, при акупунктуре, пирсинге, нанесении татуировок, при оказании ряда услуг в парикмахерских. Главная особенность вируса гепатита С – его генетическая изменчивость, выраженная способность к мутациям. Известно 6 основных генотипов вируса гепатита С. Однако, благодаря мутационной активности вируса, в организме человека могут присутствовать около четырех десятков подвидов HCV , в рамках одного генотипа. На территории РК преимущественно распространенны генотипы 1b, 2 и 3. Это один из важных факторов, определяющих персистенцию вируса и высокую частоту развития хронических форм гепатита С.

Иммунная система человека просто не в состоянии контролировать выработку нужных антител — пока вырабатываются антитела на одни вирусы – уже образуются их потомки с иными антигенными свойствами.

Для постановки диагноза используют комплексный подход, ключевую роль в котором играют лабораторные исследования.

Первый анализ, который обычно рекомендуют сделать – это определение антител к вирусу гепатита С (анти-HCV). Этот анализ устанавливает только факт инфицирования в настоящем или прошлом. Кроме того, этот анализ может давать ложно-положительные (анализ положительный, но инфекции на самом деле нет) и ложно-отрицательные результаты (анализ отрицательный, но инфекция на самом деле есть), по разным причинам.
Поэтому для точной диагностики гепатита С выполняется более сложное обследование для определения наличие РНК вируса гепатита С в крови. В настоящее время для этой цели используется качественное определение РНК вируса гепатита С (HCV RNA) с помощью высокочувствительной ПЦР диагностики в режиме реального времени с нижним лимитом определения 15 МЕ/мл с использованием автоматизированных систем закрытого типа. Для сравнения применяемые ранее анализаторы имели порог чувствительности 300 МЕ/мл. Таким образом, оно подтверждает как наличие инфекции, так и факт репликации (размножения) вирусов в организме. Количество вирусов в крови (вирусная нагрузка) позволяет судить об активности или скорости размножения вирусов.
Чем выше вирусная нагрузка, тем активнее репликация вирусов. Высокая вирусная нагрузка – это фактор, ухудшающий эффективность противовирусной терапии. Чем ниже вирусная нагрузка, тем выше шансы успешного излечения.
Кроме того, если содержание вируса высокое, то больной с большей вероятностью может заразить других лиц (половых партнеров, членов семьи).

В целом, вирусологическая диагностика проводится исходя из следующих принципов:

?1. Определение anti-HCV – первая линия диагностики ВГС (рекомендация А1).

?2. В случае подозрения на острый ВГС или у иммуносупрессивных пациентов необходимо определение HCV RNA (рекомендация А1).

?3.Если тест на anti-HCV положительный, необходимо определить HCV RNA чувствительным молекулярным методом (рекомендация А1).

?4. Пациенты с положительным тестом anti-HCV и отрицательным молекулярным тестом на HCV RNA должны быть протестированы на HCV RNA через 3 месяца для подтверждения элиминации вируса (рекомендация А1).

Вирус гепатита С (HCV), количественное определение РНК

Вирусный гепатит С (HCV) — инфекционное заболевание, вызываемое РНК-содержащим вирусом гепатита С. Путь передачи — преимущественно парентеральный и инструментальный. Источник инфекции — больной или носитель вируса. Инкубационный период в среднем 6-8 недель. Острый гепатит С часто не проявляется клинически на начальных стадиях заболевания, либо проявления неспецифичны (общая слабость, повышение температуры, боль в суставах и т.д.). Прогноз неблагоприятный — практически всегда формируется хроническая форма заболевания, а в дальнейшем развивается цирроз печени и гепатоцеллюлярный рак.
Выявление РНК HCV говорит о наличии острого или хронического гепатита С.
Количественное определение РНК HCV (вирусная нагрузка) — один из важнейших показателей, позволяющий спрогнозировать эффективность противовирусного лечения, а в дальнейшем — оценить ее (для этого сравнивают РНК ВГС после проведенного лечения и изначальную концентрацию РНК HCV.

Самый распространенный путь передачи Hepatitis C Virus – гемоконтактый, т.е. через кровь. Заразиться можно через многоразовые шприцы, препараты для переливания крови, во время нанесения татуировок и прочее. Заражение при половом контакте и передача вируса от матери к ребенку происходят редко, но исключать такую вероятность нельзя.

Другие публикации:  Купание после ветрянки у детей

Вирусный гепатит может протекать со слабо выраженной клинической картиной или бессимптомно. В таких случаях заболевание долгое время остается не выявленным. Тем не менее, отсутствие симптомов не означает, что возбудитель не оказывает негативного воздействия на организм. Происходит поражение печени, которое диагностируется на поздних стадиях. В острой форме заболевание протекает только у 15% пациентов. Наблюдается потеря аппетита, слабость, ломота в теле, тошнота. Более чем у половины инфицированных пациентов заболевание переходит в хроническую форму, которая может стать причиной развития цирроза печени.

Если в крови выявляется РНК вируса гепатита С, это свидетельствует о том, что возбудитель заболевания размножается в организме. Результаты анализа используются для ранней диагностики. РНК возбудителя определяется в крови уже на 10-12 день с момента инфицирования. В это время специфические антитела еще не вырабатываются, отсутствуют изменения биохимических показателей функций печени.

Результаты данного исследования дают врачу возможность прогнозировать течение заболевания и контролировать ход терапии. Эффективность лечения определяется изменением количества РНК возбудителя в крови. Если лечение не дает нужного эффекта, врач может изменить терапию.

Не менее 3 часов после последнего приема пищи. Можно пить воду без газа.

Данный анализ направлен на выявление РНК вируса гепатита С в крови пациента. В ходе исследования определяется ВГС методом ПЦР. При этом осуществляется количественный подсчет числа копий вирусной РНК возбудителя в образце генетического материала. Отличительной особенностью вируса гепатита С является высокая мутационная активность. Он быстро размножается в крови человека и вызывает различные заболевания. Вирус способен избегать противодействия иммунной системы. Эффективность медикаментозной терапии и прогноз напрямую зависят от типа возбудителя.

Показания к исследованию:

  • микст-гепатиты;
  • гепатит С в хронической и острой форме;
  • планирование противовирусной терапии;
  • качественное выявление вируса гепатита С;
  • окончание курса терапии (анализ проводится для оценки его эффективности).

Интерпретация результата

Результаты лабораторных исследований не являются единственным критерием, учитываемым лечащим врачом при постановке диагноза и назначении соответствующего лечения, и должны рассматриваться в комплексе с данными анамнеза и результатами других возможных обследований, включая инструментальные методы диагностики.
В медицинской компании «LabQuest» Вы можете получить персональную консультацию врача службы «Doctor Q» по результатам исследований во время приема или по телефону.

Вирус гепатита С (Hepatitis C Virus), количественное определение РНК (плазма крови)

Не менее 3 часов после последнего приема пищи. Можно пить воду без газа.

Метод исследования: ПЦР

Вирусный гепатит С (ВГС) — инфекционное заболевание с парентеральным механизмом передачи, возбудителем которого является РНК-содержащий вирус гепатита С. Инкубационный период — в среднем 6-8 недель. Заболевание характеризуется высокой частотой формирования хронических форм и последующим развитием цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы.

Концентрация РНК ВГС (вирусная нагрузка) — один из критериев прогноза эффективности противовирусной терапии и ее оценки в ходе проводимого лечения. Для оценки эффективности противовирусного лечения оценивается изменение уровня РНК ВГС от исходного уровня.

ПОКАЗАНИЯ К ИССЛЕДОВАНИЮ:

  • Больные ХГС перед началом противовирусной терапии.

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ:

Линейный диапазон измерения: 300–1·10 8 МЕ/мл.

Выявление РНК вируса гепатита С — доказательство инфицированности ВГС. Пациенты с высокой вирусной нагрузкой (высокой концентрацией РНК ВГС) до лечения хуже отвечают на противовирусную терапию препаратами интерферона. Низкая вирусная нагрузка является независимым фактором, влияющим на достижение устойчивого вирусологического ответа.

Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом № 323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации» от 21 ноября 2011 года, должны производиться врачом соответствующей специализации.

» [«serv_cost»]=> string(4) «3360» [«cito_price»]=> NULL [«parent»]=> string(2) «25» [10]=> string(1) «1» [«limit»]=> NULL [«bmats»]=> array(1) < [0]=>array(3) < ["cito"]=>string(1) «N» [«own_bmat»]=> string(2) «12» [«name»]=> string(22) «Кровь с ЭДТА» > > >

Гепатит С. ПЦР

Всем здравствуйте!На днях сдала анализ гепатита С (ПЦР качественный) — результат оказался положительным, хотя многие годы он был отриц.Думаю что делать. Или ещё раз пересдать в другой клинике или сдать ПЦР генотипирование или ПЦР количественный. Что посоветуете?

Эксперты Woman.ru

Узнай мнение эксперта по твоей теме

Коротина Светлана Юрьевна

Врач-психотерапевт. Специалист с сайта b17.ru

Кирилл Будкевич

Психолог, Сбываю мечты по-сходной-цене. Специалист с сайта b17.ru

Бажажина Светлана Владимировна

Психолог, Коуч. Специалист с сайта b17.ru

Студеничник Надежда Ивановна

Психолог, Онлайн-консультант. Специалист с сайта b17.ru

Данилова Алена Игоревна

Психолог, Супервизор. Специалист с сайта b17.ru

Узунова-Цебенога Елена Ивановна

Психолог, Онлайн Семейный терапевт. Специалист с сайта b17.ru

Оксана Тисиневич

Психолог. Специалист с сайта b17.ru

Ольга Яценко

Психолог. Специалист с сайта b17.ru

Сахарова Ольга Анатольевна

Психолог, Гештальт-терапевт. Специалист с сайта b17.ru

Сокол Лариса Ивановна

Психолог, Гештальт-терапевт. Специалист с сайта b17.ru

[2889031778] – 24 марта 2010 г., 01:05

И то, и то сдавай

[4007469185] – 24 марта 2010 г., 07:57

я вчера тоже получила анализы. слава богу у меня он отрицательный. только антитела положительно. но врач предупредила, что в течении жизни он (ПЦР) может меняться и вот тогда надо будет лечить. а что бы он не менялся надо от много чего отказаться. загарать нельзя, сауны, бани нельзя, алкоголь нельзя. короче любой толчек и он положительный.
а вам теперь надо сдать на генотип определить его и определяться с лечением. ну и нагрузку на печень тоже сдать. если лечиться по соц. программе бесплатно. то это лечение эффективно при 3 генотипе. а вот 1 и 2 лучше за деньги. но дорого. внеделю будет уходить около 50000.

[4007469185] – 24 марта 2010 г., 08:00

Да удачи вам. Выздоравливайте скорее.

[3079288794] – 24 марта 2010 г., 08:36

У меня знакомая прошла терапию по программе (бесплатно), у нее генотип 1. Пока ПЦРка минусовая. У меня тоже ПЦР плюсовой, генотип пока не знаю. Жду ребенка. После родов хочу встать на очередь по соц. программе, т.к. 50000 в неделю на лечение у меня просто нет.

[4007469185] – 24 марта 2010 г., 08:54

А вообще столько людей сейчас узнают что имеют этот вирус. в нашей стране он так быстро распространился. я сама не поняла где могла подцепить эту заразу. операций не было. в больницах не лежала разве что в детстве. остается либо стомотолог либо косметолог когда делала татуаж губ.
думаю раз такая проблема в России то скоро лет так через 5 наши ученые изобретут какое нибкдь лекарство коорое будет эффективно при любом генотипе. и лечение будет происходить как например гриппа. раз и за неделю ты здоров.

[684823828] – 24 марта 2010 г., 10:21

простите,а сколько недель продолжается лечение, если платно?

[2682116094] – 24 марта 2010 г., 11:40

я вчера тоже получила анализы. слава богу у меня он отрицательный. только антитела положительно. но врач предупредила, что в течении жизни он (ПЦР) может меняться и вот тогда надо будет лечить. а что бы он не менялся надо от много чего отказаться. загарать нельзя, сауны, бани нельзя, алкоголь нельзя. короче любой толчек и он положительный. а вам теперь надо сдать на генотип определить его и определяться с лечением. ну и нагрузку на печень тоже сдать. если лечиться по соц. программе бесплатно. то это лечение эффективно при 3 генотипе. а вот 1 и 2 лучше за деньги. но дорого. внеделю будет уходить около 50000.

У меня был геп С генот. 1В. Лечение дороге но не настолько как вы написали. около 35 тысяч в месяц. это комбенированое лечение интрон-а подкожно через 2 дня на 3 + вероребоверин по сколько капсул точно не помню. и так я лечилась 1 год и 2 мес. так теперь не только пцр отрицат. но даже маркеров гепетита С нет . сдавала не раз. вот так. удачи вам.

[2682116094] – 24 марта 2010 г., 11:46

А вообще столько людей сейчас узнают что имеют этот вирус. в нашей стране он так быстро распространился. я сама не поняла где могла подцепить эту заразу. операций не было. в больницах не лежала разве что в детстве. остается либо стомотолог либо косметолог когда делала татуаж губ. думаю раз такая проблема в России то скоро лет так через 5 наши ученые изобретут какое нибкдь лекарство коорое будет эффективно при любом генотипе. и лечение будет происходить как например гриппа. раз и за неделю ты здоров.

Другие публикации:  Сколько стоит анализ крови на гепатит

скорее всего через татуаж я вот тоже грешу на татуировку, ну больше негде было. тем более половым путем гепатит с не передаеться. это только контакт с кровью больного. и все-таки что это за лечение за полотос в неделю. что за препараты. интрон а и вероребоверин это единственное зарегистрированное лечение во всем мире которое применяют. так вот у меня на него уходило 35 в среднем, в месяц . а вы про что?

Вирус гепатита С (Hepatitis C Virus), качественное определение РНК (плазма крови)

Не менее 3 часов после последнего приема пищи. Можно пить воду без газа.

Метод исследования: ПЦР

При одновременном заказе услуги 030202 с количественным и генотипирующим исследованием, в случае положительного результата, срок исполнения может быть увеличен до получения окончательного результата.

Вирусный гепатит С (ВГС) — инфекционное заболевание с парентеральным механизмом передачи, возбудителем которого является РНК-содержащий вирус гепатита С. Инкубационный период — в среднем 6-8 недель. Заболевание характеризуется высокой частотой формирования хронических форм и последующим развитием цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы.

Выявление РНК ВГС является подтверждением острого или хронического гепатита С. Определяется в крови со 2-й недели инфицирования, появляется раньше anti-HCV, что позволяет диагностировать заболевание на ранних сроках. Определение РНК проводится у лиц с клиникой острого гепатита и лиц с положительными результатами определения anti-HCV.

ПОКАЗАНИЯ К ИССЛЕДОВАНИЮ:

  • • Пациенты с признаками ОГ;
  • Пациенты с положительным результатом обнаружения anti-HСV IgG;
  • Пациенты с иммунодефицитом, имеющие заболевание печени неясной этиологии;
  • Больные ХГС во время и после противовирусного лечения;
  • Доноры.

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ:

Референсные значения (вариант нормы):

Результат пцр рнк гепатита с

Поиск по сайту

Диагностика Гепатита С.(ПЦР,Фиброскан,АЛТ,ИФА и др.)

Автор: Саша Кортасарова 05.04.2012 13:20

Здесь я приведу небольшую расшифровку способов диагностики ВГС и приведу примерные цены.Если что — сразу дополняйте и исправляйте меня;))

АНТИТЕЛА— анализ на антитела к Гепатиту С.
В ответ на попадание в организм человека инородных частиц, таких, как вирусы, иммунная система вырабатывает иммуноглобулины — защитные антитела. Эти антитела выявляют специальным анализом методом ИФА.Все антитела носят общую аббревиатуру anti-HCV,антитела бывают двух классов — G и M, что в анализах пишется, как IgG и IgM (Ig – immunoglobulin (иммуноглобулин) — это латинское название антител)
Тест на определение этих маркеров проводится всем пациентам, когда хотят проверить, есть ли у них гепатит С.
Anti-HCV присутствуют как при остром (они могут обнаруживаться уже с 4 — 6 недели после инфицирования), так и при хроническом гепатите. Anti-HCV total( суммарные антитела)также встречаются у тех, кто переболел гепатитом С и выздоровел самостоятельно. У таких людей данный маркер может обнаруживаться в течение 4 — 8 и более лет после выздоровления. Поэтому положительный анализ на anti-HCV не является достаточным для того, чтобы установить диагноз. На фоне хронической инфекции суммарные антитела выявляются постоянно, а после успешного лечения сохраняются длительное время , при этом их титры постепенно снижаются.
У ряда больных с самоограничивающимся течением инфекции anti-HCV никогда не появляются.

Интерпритация результатов:
В случае обнаружения антиHCV-антител, тестирование проводится повторно другим методом. При повторно положительном результате выдается ответ HCV — «положительно», HCV (подтверждающий) — «положительно».
При отсутствии антиHCV-антител выдается ответ — «отрицательно».
Примерная стоимость анализа — 100 000 р.

ПЦР качественный (полимеразная цепная реакция)-
(определение РНК вируса гепатита С), часто называемый ПЦР гепатита С — это исследование крови, позволяющее выявить непосредственно генетический материал вируса гепатита (каждый вирус — это одна частица РНК)указывает на наличие вируса в крови. Данный тест необходимо проводить всем пациентам, у кого обнаружены антитела к гепатиту С. Референсные значения (значение, которое должно быть в норме) — «не обнаружено». Результат «обнаружено» может свидетельствовать о том, что вирус размножается и инфицирует все новые клетки печени. Качественный тест ПЦР имеет определенную чувствительность (10-500 МЕ/мл.). Это означает то, если вирус присутствует в крови в очень малой концентрации (ниже порога чувствительности метода), может быть получен результат «не обнаружено». Поэтому, при проведении качественного ПЦР у пациентов с низкой виремией (концентрацией вируса), например, проходящих противовирусную терапию, важно знать чувствительность диагностической системы.
РНК вируса гепатита С выявляется в крови уже через 5 дней после инфицирования, т. е. задолго до появления антител к гепатиту С. Время появления anti-HCV различно: в одних случаях — через 2 — 4 недели после начала гепатита, в других — через месяцы после повышения уровня аминотрансфераз.
Качественный ПЦР-анализ может быть только либо положительным, либо отрицательным (третьего не дано). Все остальное («полуположительный», «полуотрицательный», и прочее) не имеет никакого смысла.
ПЦР количественный (вирусная нагрузка)—
это тест на концентрацию вируса (виремию) в крови. Вирусная нагрузка — это количество единиц генетического материала (вирусной РНК), которая присутствует у Вас в определенном объеме крови (обычно это 1 мл, что соответствует 1 кубическому сантиметру). Это количество выражается в цифрах, единицы измерения МЕ/мл (международные единицы на миллилитр). Количество вируса может быть отображено по-разному. Например, 1,5 млн МЕ/мл, что соответствует 1.500.000 МЕ/мл или 1.5* 106 МЕ/мл. В некоторых лабораториях используются другие единицы измерения — копии/мл. Коэффициент пересчета из копий в международные единицы различный для разных тест-систем. Примерно значения можно пересчитать по формуле 1 копия/мл = 4 МЕ/мл, например, 5.5* 105 МЕ/мл = 2.2* 106 МЕ/мл.
Важно знать, что не существует прямой связи между концентрацией вируса в крови и тяжестью гепатита С.

На что же влияет вирусная нагрузка?

Во-первых, на инфекционность болезни. Чем выше концентрация вируса, тем выше риск передать вирус. Во-вторых, концентрация вируса влияет на эффективность лечения. Так, низкая вирусная нагрузка является благоприятным фактором при проведении терапии, а очень высокая – неблагоприятным.

Также, количественный ПЦР имеет большое значение при проведении терапии для оценки ее успешности и планировании длительности курса. Так, при быстром ответе на лечение и низкой виремии перед терапией, сроки лечения могут быть сокращены. И, наоборот, при медленном снижении концентрации вируса, ПВТ может быть продлена.

Какая нагрузка считается низкой, а какая — высокой?

Высокой принято считать нагрузку свыше 800 *103 или 800.000 ME/мл, что примерно составляет 300*104 или 3.000.000 копий /мл. Нагрузка свыше 1*107 ME/мл считается очень высокой. Однако до сих пор среди специалистов нет общего мнения о значениях, разграничивающих высокую и низкую виремию. Так, в некоторых работах этой границей считается цифра 400.000 ME/мл.

Как часто нужно делать количественный тест?

Обычно его делают перед проведением терапии и после 12-й недели лечения для оценки ее эффективности в случае, если качественным тестом РНК еще определяется.

Результатом количественного теста может быть количественная оценка виремии в формате, описанном выше, а также результаты «ниже диапазона измерений» и «не обнаружено».

Порог чувствительности количественного ПЦР обычно выше, чем качественного. Так, для системы COBAS AMPLICOR он составляет 600 ME/мл. Результат «не обнаружено» может означать, что количественный тест и подтверждающий качественный тест не обнаружил вирусную РНК. Результат «ниже диапазона измерений» означает, что количественный тест не выявил РНК гепатита С, но вирус присутствует в очень малой концентрации (в случае, если при этом был проведен дополнительный подтверждающий качественный тест).

ГЕНОТИПРИРОВАНИЕ- (определение генотипа вируса Гепатита С)
Насчитывают 11 генотипов ВГС, однако в России распространены 3 основных генотипа — 1, 2 и 3, поэтому большинство диагностических центров определяют генотипы (генотипируют) 1, 2 и 3.
Генотипирование (определение генотипа вируса) — один из самых важных анализов. Он позволит предсказать Ваши шансы на успешное лечение и поможет врачу определить необходимые дозы препаратов и длительность Вашей терапии. Важно знать, что наличие у вас вируса того или иного генотипа не значит, что Вы больны легче или тяжелее.
Зачем нужно определять генотип?

Это очень важный анализ. Разные генотипы имеют различную резистентность (устойчивость) к лечению. Так, например, генотипы 2 и 3 лечатся стандартной терапией в течение 24 недель с эффективностью до 85%, а генотип 1 и 4 — 48 недель с эффективностью до 60%. Также есть данные, что у пациентов с генотипом 3 чаще обнаруживается сопутствующее заболевание печени — стеатоз.

Имеет ли значение субтип генотипа, например 1a?
Ответ:
Нет, клинического значения субтип не имеет. Главное·— определить цифру (сам генотип).

Другие публикации:  Капли полиомиелита инструкция

Что значит, если в результатах генотипирования стоит «генотип не типируется»?
Ответ:
Это может быть по двум причинам — у Вас не типичный для нашего региона, «экзотический» генотип HCV или низкая концентрация вирусной РНК в крови. В первом случае, нужно переделать анализ в другой лаборатории, которая типирует генотип 4. Если результат будет прежним, то лечение проводят по схеме для генотипа 1. Во втором случае нужно пересдать тест в диагностическом центре с более чувствительным оборудованием.

Может ли генотип измениться с течением времени?
Ответ:
Нет, для этого требуется тысячи лет. У некоторых пациентов имеется 2 и более генотипов, но преобладает один. В таком случае анализом может обнаружиться только один генотип. Бывают случаи, когда у пациентов определяли, к примеру, генотип 3a, а после лечения выявляли генотип 1b. Причиной тому было одновременное присутствие генотипов 3 и 1b. От первого типа удалось избавиться в результате терапии, а второй из-за устойчивости к препаратам оставался в организме.

Результат пцр рнк гепатита с

Хронический гепатит C

Маркеры вирусного гепатита B у доноров крови и в группах сравнения

Хронический гепатит C: (1)

Латентные формы вирусных гепатитов B и C у лиц молодого возрастa

Латентные формы вирусных гепатитов B и C у лиц молодого возрастa: (1)

В .С. Малышев, А .Г. Тоневицкий, А .М. Ведяков, О .Е. Потехин, Н .А. Арефьева, Ю .В. Сергеев, В.Г. Лунин.

Центральная клиническая больница Медицинского центра УД Президента РФ, Институт трансплантологии и искусственных органов МЗ РФ, Институт аллергологии и клинической иммунологии, Москва.

При обследовании доноров на трансмиссивные инфекции на первое место по распространенности за последние годы вышел вирусный гепатит С (ВГС). Серопозитивные к ВГС лица составляют, по нашим данным, 1,7 % среди первичных доноров. Тесты иммуноблотта на анти-ВГС, применяемые в качестве подтверждающих при положительных/сомнительных результатах ИФА, при исследовании доноров отличаются высоким процентом неопределенных результатов. В группе доноров, отведенных от кроводач по наличию анти-ВГС (18 человек), с сомнительными результатами в иммуноблотте LiaТek HCV III на анти-ВГС (1 человек) или по эпидемиологическим показателям провели повторный анализ на РНК ВГС с помощью двухстадийной (nested) ПЦР (разработка НИИТиИО) и в тесте «Amplicor HCV-test» (Roche) спустя 6-24 месяцев после отвода. Обнаружено наличие РНК ВГС у 5 доноров (25%). Отмечено полное совпадение результатов, полученных в двухстадийной ПЦР и в «Amplicor HCV-test».

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: вирус гепатита С, РНК, доноры крови, ПЦР.

Вирус гепатита С (ВГС) является причиной большинства случаев гепатитов «ни А, ни В» с парентеральным механизмом передачи. ВГС относится к семейству флавивирусов с одноцепочечным РНК- геномом . ВГС-инфекция представляет серьезную проблему для здравоохранения из-за высокой частоты развития хронического гепатита С (хронизация у 75-80 %), с риском развития цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы [ 3 ].

Заражение ВГС индуцирует выработку антител к ВГС (анти-ВГС), которые, ввиду высокой хронизации инфекции, рассматриваются в качестве маркера инфицирования. Уровень анти-ВГС позитивных лиц колеблется от 0,2 — 0,6 % в Северной Европе до 4 — 20 % в Африке. В России анти-ВГС выявляется у 1 — 3 % населения, с более высокими показателями в Сибири и на Дальнем Востоке. При этом наблюдается дальнейший рост числа инфицированных [1]. При скрининге донорской крови определяют антитела к вирусу гепатита С. Однако данный подход не в полной мере предотвращает случаи посттрансфузионных гепатитов [6]. В связи с этим в некоторых странах Западной Европы с 1999г. введено обязательное тестирование донорской крови на РНК ВГС, основанное на полимеразной цепной реакции (ПЦР) и широко применяемое в диагностике и мониторинге ВГС-инфекции [ 2].

Оценка актуальности тестирования доноров крови на РНК ВГС с помощью различных ПЦР-методик: двустадийной (nested) и теста Amplicor hepatitis C virus test (Roche).

Материалы и методы. В работе рассмотрены результаты исследования, выполненного в Центральной клинической больнице МЦ УД Президента РФ и в НИИТиИО МЗ РФ. Было обследовано 20 доноров отделения «Банк крови» с положительными/сомнительными данными при тестировании на анти-ВГС. Данные по биохимическим показателям (активность трансаминаз АЛТ и АСТ) и маркеры вирусного гепатита В (антитела к HBs и к HBc) получены при рутинном обследовании доноров. Подробная характеристика доноров представлена в таблице 1.

Определение антител против вируса гепатита С. Скрининг сыворотки крови доноров проводили при каждой кроводаче с помощью иммуноферментной тест-системы UBI HCV EIA 4.0 (United Biomedical Inc. USA). Данная тест-система содержит сорбированные синетические пептиды , соответствующие основным антигенным участкам белков ВГС: Сor, NS3, NS4 и NS5, что позволяет выявлять антитела класса IgG соответствующей специфичности в сыворотке крови. Анализ спектра специфичности антител к белкам ВГС проводили в тесте иммуноблотта с помощью тест-системы LiaТek HCV III (Organon Тeknika), позволяющей раздельно учитывать следующие специфичности антител: Сor ( 2 специфичности), Е2/NS1, NS3, NS4 и NS5. Данные до 1996 г. получены при использовании более ранней версии тест-системы LiaТek, включавшей аналогичные пептиды, за исключением Е2/NS1 и NS5.

Детекция РНК ВГС с помощью тест-системы Аmplicor hepatitis C virus test. Детекцию РНК вируса гепатита С проводили согласно инструкции, прилагаемой фирмой. Амплификацию осуществляли на амплификаторе Perkin Elmer 2400.

Детекция РНК ВГС методом двустадийной (nested) ПЦР с использованием фермента Tth-ДНК -полимеразы. Для выделения РНК использована модифицированная методика, описанная ранее[5]. РНК выделяли из 200 мкл плазмы. Полученную РНК растворяли в 15 мкл буфера для элюции РНК. Для синтеза кДНК и 1 раунда ПЦР 10 мкл полученной РНК. Реакцию обратной транскрипции (RT) и 1-й раунд ПЦР проводили в объеме 25 мкл в одной пробирке с использованием фермента Tth-полимеразы с высокой степенью RT-активности (ВНИИ СБ РАСХН , Россия). Реакционная смесь для 1-раунда ПЦР состояла из 1Х Tth one tube RT-PCR буфера, 2,5 Ед Tth-днк- полимеразы 0,2 мM каждого из 4, дезоксинуклеозидтрифосфатов (дАТФ, д ЦТФ, дТТФ, дГТФ), 10 мкл РНК и по 10 пмоль внешних праймеров [8 ]:

5′-3′ — ctg tga gga act act gtc tt- прямой

5′-3′ — tat cag gca gta cca caa gg-обратный

Для 2 раунда ПЦР брали 0,5 мкл продукта 1 раунда амплификации. 2-й раунд ПЦР проводили с помощью Taq ДНК-полимеразы в объеме 25 мкл. ПЦР проводили в объеме 25 мкл. Стандартная реакционная смесь включала: 67 мМ Трис-НCl (рН 8,4),16 мМ сульфата аммония, 2,5 mM MgCl2 0,125 мг/мл бычьего сывороточного альбумина, 8% глицерин, 0,001% ксиленцианол, 2,5 Ед Taq-ДНК-полимеразы (ВНИИ СБ РАСХН, Россия), 0,2 мМ каждого из четырех дезоксинуклеозидтрифосфатов и по 8 пкмоль внутренних праймеров [8]:

5′-3′ — ttc acg cag aaa gcg tct ag — прямой

5′-3′ -acc caa cac tac tcg gct ag — обратный

RT-ПЦР проводили на многоканальном амплификаторе «Терцик» МС-2 (ДНК-технология, Россия) по следующей программе:

RT + 1 раунд ПЦР:

75 0С — 5 мин., 560С — 35 мин., 940 С — 2 мин.,

56 0 С — 10 сек | 40 циклов

55 0 С — 10 сек | 28 циклов

Детекцию продуктов реакции проводили методом электрофореза в 2% агарозе c 0,001% этидиум бромида, с последующей визуализацией в ультрафиолете на трансиллюминаторе. Для исключения ложноположительных результатов вследствие контаминации детекцию продуктов ПЦР и работу с продуктами 1 раунда проводили в отдельных комнатах, 30% исследуемых образцов составляли негативные контроли.